Качествен анализ на PCR за хепатит С

Хепатитът е сериозно заболяване, което има много причини. В основата на неговото развитие е прякото или косвено увреждане на черния дроб. Като се има предвид значението му за целия организъм, може да се предположи колко трудно е патологията. В тази статия ще разгледаме по-подробно характеристиките на курса и лабораторната диагностика на хепатит С. t

Причината за заболяването е вирусен агент, който се отнася до RNA-съдържащи патогени. Тя има отличителна черта - способността да мутира, т.е. да промени структурата си. Поради това инфекцията избягва атаката на имунната система и в повечето случаи води до хронично възпаление на черния дроб.

Предвид наличието на различни подтипове на вируса, изборът на лекарства трябва да се основава на резултатите от генотипирането. Въпреки продължителното проучване на заболяването и характеристиките на структурата на HCV, все още не е възможно да се разработи специфична ваксина за заболяването.

Трудностите при ранната диагностика се крият в асимптоматичния ход на хепатита, в резултат на което човек посещава лекар на етапа на цироза. За да се открие своевременно заболяване, са необходими редовни медицински прегледи. Само чрез лабораторно изследване на кръвта е възможно да се открие HCV и да се предотврати инфекция на хората около вас. Факт е, че носителят на инфекцията може дълго време да не се досети за патологията и да продължи да предава вируса на здрави хора.

Начини на предаване

В повечето случаи вирусът се разпространява чрез кръвта, тъй като съдържа най-високата концентрация на патогенни агенти. По този начин инфекцията се предава:

• с хемодиализа;
• със заразена игла;
• в процеса на борба, когато кожата е наранена и има контакт с кръвта;
• кръвопреливане (кръвопреливане).

Вероятността от инфекция по време на интимност е незначителна, тъй като спермата и вагиналните секрети съдържат малко количество патогени. Рискът от инфекция се увеличава значително в нарушение на целостта на лигавицата на гениталиите. Това се наблюдава при агресивен и анален секс.

Що се отнася до вертикалния режим на предаване, той се извършва в процеса на труда. В периода на бременност на плода патогенът не може да проникне през плацентата към ембриона. При естествено раждане, патогенният агент се предава на детето чрез травмиране на кожата му, когато се наблюдава контакт с кръвта на майката.

След проникването на патогена в здрав организъм започва синтеза на антитела, които са защитени от инфекции и принадлежат към имунни структури. Те се откриват в първоначалното проучване на човек, използващ ELISA.

За да се потвърди диагнозата, пациентът се подлага на полимеразна верижна реакция. Това е анализ на генетичния материал на патогенен агент и определянето на вирусния товар.

Лабораторна диагностика на хепатит С

Лабораторната диагноза започва с ензимен имуноанализ. Неговата основна задача е да открива антитела, произведени срещу патогена. Ефективността му е почти 95%. Благодарение на това изследване е възможно да се идентифицира носителя на вируса на предклиничния етап и да се изпрати за по-нататъшно изследване.

Качествен анализ на ELISA показва наличието или отсъствието на имуноглобулини в кръвта на пациента. Резултатът може да бъде "положителен" или "отрицателен". След получаване на първия отговор лицето се изпраща за следващия преглед - PCR. Цената му зависи от качеството на реактивите и лабораторията. Цената на полимеразната верижна реакция може да достигне 4 хиляди рубли.

PCR характеристики

Използвайки полимеразна верижна реакция, дори малко количество биологичен материал ни позволява да оценим вирусния товар в кръвта, т.е. да изчислим концентрацията на патогените в един милилитър течност.

С настъпването на PCR, диагностицирането на хепатит става много по-лесно. Анализът дава възможност да се идентифицира HCV РНК, да се установи стадия на инфекциозния процес и инфекциозността на вирусния носител.

Има няколко вида генетична диагноза:

1. Качествен анализ на PCR за хепатит С - потвърждава наличието или отсъствието на HCV в кръвта на пациента:
2. количествен, чрез който можете да изчислите концентрацията на вирусите и да установите стадия на заболяването. Резултатът се дава в IU / ml или копия / ml (в зависимост от лабораторията);
3. генотипиране - необходимо за определяне на генотипа на HCV. Това е необходимо за точен подбор на лекарства, които ще бъдат най-ефективни в този случай. Анализът индиректно показва тежестта на патологичния процес в черния дроб. Така при третия генотип на патогена най-често се наблюдава стеатоза, в основата на която е натрупването на мазнини в хепатоцитите (нейните клетки). Освен това видът на вируса влияе върху изхода и продължителността на терапевтичния курс.

Качествен анализ на PCR за хепатит С

Най-напред биологичният материал се изследва в лабораторията за наличие на HCV РНК. Важно е да запомните, че качествен анализ на хепатит С има определено ниво на чувствителност и следователно не винаги може да даде правилния отговор. В този случай се препоръчва да се извърши повторна лабораторна диагностика, като се използват други реактиви.

За да се получат надеждни резултати, трябва да се използват тестови системи с чувствителност най-малко 50 IU / ml.

Диагностичният резултат може да бъде „положителен“ или „отрицателен“. Ако патогенът не се открие в кръвта, изследването е завършено. Ако в пробата се открие патогенен агент, тогава се определя количествено вирусният товар.

Получава се фалшиво-отрицателен отговор, когато процесът е нарушен, например, активни компоненти, които потискат изграждането на копия на патогена, влизат в средата. По този начин не е възможно да се покаже истинска кръвна картина, поради което инфекцията на човек не се диагностицира.

Може да се получи фалшиво положителен резултат, ако тръбата за събиране на биологичен материал, както и средата за изследването са заразени. В допълнение, такъв анализ на реакцията е възможен при смесени инфекции, когато черният дроб е засегнат от няколко вируса, например хепатит С и D.

Показания за качествено изследване

Лекарят може да предпише на пациента качествено проучване за идентифициране на РНК на вируса на хепатит С:

• след получаване на положителен или съмнителен отговор на ензимен имуноанализ;
• за проверка на диагнозата;
• определяне на вирусния товар;
• определяне на етапа на заболяването;
• диагноза на смесена инфекция. Хепатит С често заразява черния дроб едновременно с вируса "D";
• определяне на терапевтична тактика, като се вземе предвид генотипа на причинителя;
• оценка на динамиката на промените по време на лечението с антивирусни лекарства.

Предимствата на полимеразната верижна реакция включват:

1. висока чувствителност на техниката, която позволява да се установи фактът на инфекция на предклиничния етап;
2. идентификация на генетичния материал на патогена, а не неговите антитела;
3. възможността за създаване на подтип на патогенен агент;
4. висока степен на диагностика, тъй като не се изисква засяване на материала на хранителната среда и е достатъчно да се използват специфични тестови системи. Резултатът се получава след 5 часа;
5. гъвкавост. Анализът позволява да се идентифицира всеки генетичен материал (РНК, ДНК). Благодарение на това лекарят може да потвърди хепатит С и други видове заболяване (В);
6. способността за откриване на латентна инфекция.

Количествено изследване

При изследването на кръвта чрез полимеразна верижна реакция може да се изчисли броят на патогените във фиксиран обем от биологичен материал. Показателят е представен в IU / ml. Чрез анализ е възможно да се определи степента на заразяване на пациента, да се определи етапа на инфекциозния процес, както и да се оцени ефективността на лекарствената терапия.

Въз основа на PCR, специалистът решава кои дози лекарства могат да блокират възпроизводството на патогени. Освен това се определят продължителността на антивирусното лечение и прогнозата за живота. Важно е да се помни, че тестовите системи имат висока чувствителност, следователно методът позволява да се потвърди инфекцията на човек в предклиничната фаза.

определяне на генотипа

Като се има предвид способността на патогена да мутира, неговият генотип е необходим за определяне на тактиката на лечение и избора на антивирусни лекарства. Например, лечението на HCV 1 продължава 48 седмици, като положителна тенденция се наблюдава само в 60% от случаите. Генотипи 2 и 3 имат по-благоприятна прогноза. Антивирусните лекарства се предписват за 8 месеца, а ефективността им достига 85%.

Според статистиката, в повечето случаи HCV 1, 2 и 3 са регистрирани в Руската федерация.

Когато дешифрирате лабораторен тест, този отговор може да бъде посочен - “не е въведен”. Това означава, че вирусът циркулира в кръвоносната система на пациента и не може да бъде разпознат от тестовата система. Резултатът от анализа в този случай показва, че патогенът не е типичен за дадена географска област.

Как да получите надеждни резултати?

За да се получи качествено изследване на PCR за откриване на РНК на причинителя на хепатит С, е необходимо да се спазват изискванията за подготовка за лабораторна диагностика:

1. вземането на кръвни проби се извършва на празен стомах, а „гладният” процеп не трябва да бъде по-кратък от 8 часа;
2. два дни преди изследването се препоръчва да се спре употребата на алкохолни напитки и да се изоставят пикантни, тлъсти и пушени ястия;
3. отмени въвеждането на лекарства, които намаляват съсирването на кръвта, например хепарин. Ако тези лекарства са предписани по здравословни причини, трябва да уведомите лекаря. В допълнение, специалистът трябва да е наясно с допускането на други лекарства, които могат да повлияят на резултатите от лабораторните изследвания;
4. В навечерието на събирането на биологичния материал не трябва да се извършват физиотерапевтични процедури и те трябва да бъдат подложени на тежки физически натоварвания.

Резултатите от анализа могат да бъдат повлияни не само от лицето, което дарява кръв, но и от други фактори, а именно:

• вземане на проби от кръв с лошо качество;
• неспазване на препоръките за транспортиране на биологичен материал;
• недостатъчно обучение на лабораторните работници;
• несъответствие с изследователската техника;
• въвеждане на антикоагуланти (хепарин) в навечерието на вземане на кръвни проби. Тази група лекарства намалява съсирването, като по този начин забавя работата на реагентите.

В различни лаборатории диагностичният отговор може да се различава леко, но тези грешки не оказват влияние върху крайния резултат от проучването.

Особено внимание се обръща на видовете тестови системи, които се използват в лабораторията. Често предпочитание се дава на реагенти с висока чувствителност. Това е важно за пациенти с нисък вирусен товар, защото е трудно да се открие.

Колко често се извършва лабораторен тест?

Първичната полимеразна верижна реакция се извършва при хора, които са били открити чрез имуноанализ за антитела към патогена на хепатит. В този случай, тя е предназначена да потвърди факта на инфекция на човек и да установи етапа на заболяването. В допълнение, анализът позволява да се определи подтипът на вируса, който е особено важен за избора на лекарства.

Следващият период за задължително лабораторно изследване е 3 месеца от началото на антивирусната терапия. Диагностиката позволява да се оцени ефективността на лекарствата, да се коригира дозата или да се заменят.

В допълнение към основните тестове, PCR може да се извърши допълнително на 4 и 24 седмици от началото на лечението. Положителна прогноза за заболяването се потвърждава от намаляване на вирусния товар след тримесечно лечение. Например, той трябва да намалее от 1 милион IU / ml до няколко стотин хиляди.

Ако концентрацията на патогенни агенти в кръвта остане на същото ниво или леко се повишава, това показва неефективността на антивирусните средства и изисква тяхното заместване. Като се използва PCR в края на лечението, е възможно да се потвърди възстановяването на пациента.

За правилно тълкуване на резултатите от лабораторната диагностика е необходима консултация с хепатолог или специалист по инфекциозни заболявания. Като се има предвид високата честота на фалшивите отговори при ELISA, анализът се използва изключително за първичен скрининг. За по-задълбочено изследване на пациента се използва полимеразна верижна реакция.

Pro анализ на PCR за вируса на хепатит С

Хепатит С е сериозно чернодробно заболяване за всяко лице. Патологията е причинена от флавивирус HCV, в структурата на който присъства молекулата на РНК, която носи общия генетичен код на вируса.

Патологията може да има различни форми, всичко зависи пряко от общото състояние на човека и от характеристиките на всеки отделен организъм.

Тази структура позволява да се анализира PCR за наличието в организма на вирус от категорията на хепатит С. t

Тя ви позволява своевременно да идентифицирате вирус, който е опасен за хората, да преминат курс на лечение и да възстановят здравето, предпазвайки организма от разрушаване на черния дроб.

HCV вирусът може да се прояви както в остра - опасна форма, така и в хронична. Ако дадено лице по едно или друго време е било открито за този вирус, то трябва да бъде назначено за PCR анализ.

Защо се извършва PCR анализ?

Въз основа на резултатите от анализа лекарят ще може да изготви схема на лечение

Лабораторният медицински анализ на PCR за хепатит С е изследване на биологичен материал, взет за определяне на флававирус. Изследването означава полимеразно-верижна реакция.

Той показва общата количествена стойност на вирусната лезия, нейните качествени свойства и също така е възможно да се определи генотипът на вируса, който съдържа РНК.

Важно е! На базата на този анализ лекарят определя метода, вида на терапията и продължителността му. Също така, чрез анализ е възможно да се определи общия епидемиологичен фактор, т.е. нивото на риск от предаване на болести на други носители.

Анализите в съвременната медицина също се наричат ​​РНК анализ. Причината е, че присъщият на хепатит С флававирус се състои от частица от РНК, чийто размер е приблизително 30-60 nm. Една от характерните черти на този вирус е известна склонност към мутация.

Всеки подвид или генотип има резистентност. Това обстоятелство се превръща в основа за различни методи за изследване и лечение на заболяването, както и за по-нататъшна прогноза с добре проведена терапия.

Как

Анализът се извършва строго на празен стомах, т.е. венозна кръв се дава преди закуска. Методът на тестване се осъществява с помощта на PCR в реално време или високочувствителна по съвременни стандарти за диагностика, която се извършва в реално време.

Долната граница на откриване в този случай е 15 IU / ml. Анализът се извършва стриктно при използване на затворени автоматизирани системи. Хепатит С може да се определи като се използват тестове като COBAS AMPLICOR, чиято обща чувствителност е 50-100 IU / ml.

Важно е! Всички видове подобни съвременни лабораторни изследвания се провеждат въз основа на отчитане на определен праг на чувствителност.

Става дума за способността на реагента да се използва за откриване на минималното ниво на способността на реагента да определи вируса в изследвания биологичен материал. Ако няма заболяване в организма, резултатът от проучването ще изглежда като „не е намерен“.

На снимката е показана верига за PCR анализ:

Видове PCR анализ и неговите резултати

Ако имате най-малките заболявания и болки в областта на бисквитките, трябва незабавно да се консултирате с лекар, който ще проведе задълбочено проучване. PCR анализът за хепатит С се основава на три основни точки:

1. Количествен анализ.
2. Качествен анализ.
3. Определянето на генотипа.

Извършените тестове дават възможност да се определи и идентифицира точното естество на виремията и различните симптоми на генетичния план на присъствието на патогена. Пропорционално на чувствителността, извършена от диагностичната система, медицински изследвания могат да се провеждат веднъж, както и някои потвърждения.

Това трябва да се направи, за да се изяснят получените по-рано резултати, и в този случай се използва от по-чувствителен реагент.

PCR с високо качество

Качествен анализ за PCR е друго име за изследване като полимеразна верижна реакция. При стандартната чувствителност на теста, която позволява да се определи наличието на вирусен микроб, индикаторите ще бъдат в диапазона от 10-500 IU / ml.

При отрицателен анализ на заболяването анализът ще покаже, че общото ниво на концентрация в кръвта на пациента ще бъде с порядък по-ниско от общия праг на чувствителност за диагностичната система.

Ако по време на качеството на PCR е получен „неоткрит” отговор, за последващо лечение ще трябва да знаете общия праг на чувствителност на реактива. Що се отнася до положителния отговор, по време на PCR анализа, той може да бъде получен на 4-тия ден след инфекцията. Стандартните протеинови фракции до установени флававируси могат да се появят много по-късно.

Общата схема на PCR анализите може да бъде изобразена както следва:

Количествен PCR

Количествената PCR е специален индикатор за произведения вирусен товар, отразяващ общото ниво на концентрация на вирусна РНК в човешкото тяло. Този индикатор показва количеството вирусни РНК ензими, които присъстват на кубичен сантиметър, взети от кръвната вена.

Резултатите от това изследване в системата на медицинските изследвания са обозначени в единици от един милилитър. При издадените в ръцете сертификати този показател може да изглежда 1,7 милиона или 1,700,000 IU / ml.

На тези пациенти е назначен количествен PCR анализ преди провеждане на антивирусна терапия. Вторият път се провежда на 12-та седмица от лечението, което ви позволява да оцените правилно резултатите от лечението с хепатит С. С други думи, анализът позволява да се определят такива важни параметри като:

1. Определя се нивото на инфекциозност, т.е. степента на риск от микробно предаване от заразен човек на здрав човек. Колкото по-висока е концентрацията на флававирусна РНК, толкова по-голяма е вероятността от заразяване на друг човек, което е важно при сексуалните отношения.
2. Общото ниво на ефективност и избрания метод на лечение.
3. Това е идеална възможност за определяне на продължителността и прогнозата на антивирусната терапия. Като правило, колкото по-голям е товарът, толкова по-дълго ще продължи лечението.

Струва си да се знае, че количествената PCR зависи от специфичния вид лабораторен тест и прага на чувствителност. Най-ниската граница на установения стандарт е показателят, който не достига 600 000 IU / ml.

Средната стойност е в диапазона от 600,000 до 700,000 IU / ml. Ако се получат резултати над 800 000 IU / ml, лекарят веднага определя високо ниво на концентрация на вещество като РНК с вирус, присъстващ в състава.

Важно е! Пряката връзка между нивото на HCV РНК и тежестта на заболяването предполага, че този вирус присъства в общия състав на кръвта, а също така отбелязва сложността на патологията. Пациентът може да има достатъчно висок вирусен товар. В допълнение, тази връзка показва, че има доста сериозно увреждане на клетките.

определяне на генотипа

Поради относително високата мутационна активност на HCV в природата, в хода на извършените тестове е възможно да се определи как е наличен вирусът в кръвта на болен човек. В съвременната медицина са известни 11 генотипа на вирус като хепатит С. Той включва доста голям брой различни подвидове или подтипове.

Видовете 1,2 и 3 са известни и често срещани в Русия.Общо, генотипирането е много важен елемент от извършения анализ. С него лекарят разбира нивото на резистентност или резистентност на патологията към избраните лекарства.

Почти винаги въз основа на този анализ се изгражда бъдещо лечение. Това е важно, защото има правила за лечение като:

Качествен анализ за хепатит С

8 март 2017, 12:29 Експертни статии: Нова Владиславовна Извчикова 0 10,547

Качествен анализ на полимеразната верижна реакция - PCR за хепатит С определя наличието или отсъствието на HCV в организма. В лабораторни условия се изследва структурата на РНК, която ще включва вируса. В случай на откриване на вируса С е необходимо да се подложи на курс на лечение, тъй като пренебрегнатото състояние на черния дроб ще доведе до тежки последствия. Висококачествената PCR се извършва след възстановяване, за да се потвърди отсъствието на антитела. Назначен и за рутинна инспекция. При ниска концентрация на причинителя в кръвта, PCR (качествена) може да не открие нищо, тъй като диагностичната система има собствени прагове на чувствителност. В случай на начален стадий на заболяването или лека форма, PCR се извършва чрез ултрадиагностика на ултра-чувствително оборудване.

Какво е РНК вирус?

Терминът РНК на вируса на хепатит С (или РНК на вируса на хепатит С) е самата болест на черния дроб. Вирус С се свързва със здравата клетка на тялото чрез проникване вътре. С течение на времето, разпръснати из цялото тяло, е необходимо само да влезе в кръвта. В резултат на това патогенът прониква в черния дроб, слива се с клетките си и работи усилено. Чернодробните клетки (хепатоцити) работят под негово влияние, претърпяват промени и от това умират. Колкото по-дълго вирусът С е в черния дроб, толкова по-голям брой клетки умират. С течение на времето се развиват опасни заболявания, водещи до злокачествена дегенерация и смърт.

Инфекцията на черния дроб с този вид вирус може да не се прояви външно. В продължение на много години или десетилетия заразен човек се чувства напълно здрав и само случайно изследване най-често разкрива патология. Когато се дарява кръв за хепатит, се изследва част от веригата РНК (рибонуклеинова киселина), която е част от човешкия ген (ДНК). Резултатите от лабораторните тестове не трябва да се използват за самолечение, защото това е само индикатор. Точната картина и по-нататъшната диагноза се определят по-добре от лекаря.

Когато е направено: индикации за изследване

В потвърждение на HCV се извършва PCR анализ (полимеразна верижна реакция). PCR проучванията помагат за намиране на причинителя в структурата на РНК и предписват ефективна терапия. Назначава се в следните случаи:

• откриване на признаци на възпаление на черния дроб;
• скринингови проучвания за превенция;
• изследване на контактни лица;
• диагностика на хепатит със смесен произход (определяне на основния патоген);
• определяне на нивото на репродуктивната активност на вируса в хронична форма;
• цироза на черния дроб;
• да се определи ефективността на предписаното лечение.

Изследвания PCR предписва на лекар да определи ефективността на курса на лечение на хепатит.

Има качествен и количествен анализ на PCR. Количествената PCR показва процента на РНК с носители на вирус в кръвта и качествено показва вирусното присъствие или отсъствие. Положителният показател за качество (присъствие на хепатит С РНК) също се нуждае от количествено изследване. Високото ниво на концентрация на причинителя на хепатит С е свързано с риска от неговото предаване, т.е. инфекция на други. Ниските числа са по-добре лечими. Количеството на РНК вирусите в кръвта не е свързано с интензивността на заболяването. PCR анализът се извършва също и в случай на интерферонна терапия, за да се предпише продължителността и сложността на курса на лечение.

Характеристики на висококачествения PCR анализ за хепатит С

На всеки качествен анализ е даден индикатор за полимеразна верижна реакция за всички пациенти, които имат антитела срещу хепатит С в кръвта си. Препоръчва се да се направи анализ за хепатит В, след това, в случай на положителен изход и за хепатит D. Също така, качествено анализираната реакция трябва да се извърши заедно с други кръвни тестове. Анализите ще покажат пълна картина на разпространението на вируса.

От резултатите от теста ще бъде видим или отрицателен само положителен тест за хепатит С, т.е. наличието или отсъствието на вирус. Ако изходът е "открит", тогава вирусът е и продължава да бъде активен. Обозначението "не е открито" показва липсата на вирус или неговото малко количество. С този показател трябва да се има предвид, че аналитичната чувствителност на диагностичните системи е различна и че РНК хепатит С може все още да е в кръвта, но не се проявява в анализа.

Особено чувствителен метод на PCR показва ултра хепатит С дори и в малки количества. Използва се изследване на флуоресцентна хибридизация, което е многократно по-високо от стандартните PCR системи. Методът се използва в няколко случая:

• подозирани скрити форми на хепатит С;
• PCR диагностиката не потвърждава патогена, но има антитела;
• в случай на възстановяване;
• за откриване на ранна инфекция.

Обратно към съдържанието

Декодиращ анализ

PCR декодирането на HCV влияе на крайното решение, когато се поставя диагноза, по-специално с ултраметодния метод. Основният недостатък на това изследване е стриктното спазване на стерилните условия за пробата и материалите. Леко отклонение понякога показва неточни аналитични заключения, усложнява диагностиката и последващото лечение. Анализ на PCR за определяне на хепатит RNA не винаги уверено показва картина на заболяването, понякога са позволени неточности и в двете посоки.

Диагностициране на вируса на хепатит, се препоръчва да се използва цялостен преглед.

Норма на показателите

Отсъствието на JgM антитела срещу вирусен хепатит С в резултатите от изследването се счита за норма при анализа на полимеразната верижна реакция. В същото време констатациите от серологичния анализ показват наличието на антитела срещу вирус С и това също е в нормалните граници. Една качествена дефиниция не показва интензивността на заболяването, а само разкрива причинителя на хепатит С в РНК. Този анализ се повтаря след третиране, за да се потвърди действителното възстановяване.

отклонения

Ако са налице JgM антитела към HCV РНК, това показва развитие на инфекция. Заболяването в същото време протича остро или хронично, проявявайки се на различни етапи. Ако се регистрира намаляване на броя на антителата, анализът показва, че резултатите от лечението са постигнати по време на възстановяването. Има изключително редки случаи на фалшиво положителни резултати в диагностиката. Те се срещат при жени по време на бременност и при хора с други инфекциозни заболявания.

PCR анализ за хепатит С

За диагнозата "хроничен вирусен хепатит С (CVHS)" се изисква цялостно изследване на лицето, което включва клинични, лабораторни и инструментални изследвания. Важно от гледна точка на диагнозата за правилната диагноза е PCR методът - полимеразна верижна реакция.

Какво показва този анализ и защо е необходимо?

Този лабораторен метод открива РНК на вируса на хепатит С в човешката кръв. Заедно с ензимно-свързания имуносорбентен анализ (ELISA) за антитела към вируса, PCR се използва за поставяне на диагноза на CVHC и неговия патогенен генотип. Това изследване е един от най-новите методи за лабораторна диагностика. Неговата надеждност при CVHS надхвърля 97%, което се счита за много добър показател за научни изследвания.

Има три PCR кръвни теста за CVHS: качествено, количествено и генотипизиране на вируса. Първото проучване (качествен анализ) на вируса го открива в кръвта и затова се използва само за диагностика.

Второто (количествено) изследване определя степента на вирусно натоварване на организма, следователно се използва за наблюдение на ефективността на терапията.

Третият PCR (генотипизиране) изяснява диагнозата, установявайки генотипа на вируса, което е много важно за назначаването на правилно антивирусно лечение.

Същността на полимеразно-верижната реакционна техника е използването на ензими, които умножават генетичния материал на патогена в биоматериала. В процеса на такава репликация тръбата с кръв се нагрява няколко пъти и се охлажда до температурата, необходима за ускоряване на ензимната реакция. В резултат на тези манипулации, количеството на вирусния геном се увеличава многократно, което позволява да бъде открито дори с минимално количество.

PCR диагностиката има много предимства пред другите лабораторни тестове:

• висока чувствителност - 97-98%;
• гарантирана аналитична специфичност (разкрива точно патогена, който искате да намерите, а не неговия свързан щам);
• скорост на провеждане (отнема не повече от 2 дни, за да се получи заключение).

Три вида PCR анализи

Висококачествен PCR анализ се възлага на всички пациенти, при които ELISA анализът открива антитела към вируса на HVGS. След провеждане на висококачествена PCR могат да се получат две опции за отговор: "РНК се открива" или "РНК не се открива". За да се установи минималното количество вирус в кръвта, са необходими тестови системи с чувствителност най-малко 50 IU / ml. Ако концентрацията на вируса в кръвта на пациента е по-малка, отколкото диагностициумът може да определи, резултатът от проучването може да бъде фалшиво отрицателен. За да се избегне подобна диагностична грешка, лабораториите, извършващи PCR диагностика, трябва да бъдат снабдени с високо чувствителни тестови системи. В лабораторията "Invitro", например, се използват тестове с чувствителност от 15 IU / ml. Лабораторните работници са задължени да предоставят информация за чувствителността на тестовете на пациентите и лекарите при първото им искане.

Количественият анализ на PCR определя степента на виремия, т.е. концентрацията на патогена в кръвта, вирусния товар. Резултатът от това изследване, за разлика от висококачествената PCR, се изразява в числа, например 2 × 10 * 6 IU / ml, което означава 2 милиона международни единици в 1 ml кръв. Някои лаборатории използват друг индикатор - броя копия / ml. Тези два индикатора са лесни за преобразуване: 1 международна единица се равнява на 4 копия на РНК. Така, 2 х 10 х 6 IU / ml ще означава, че 8 х 10 х 6 копия на вирусна РНК в 1 ml, т.е. 8 милиона копия в 1 ml кръв.

Генотипирането е дефиницията на един от шестте генотипа на вирус. Клиничната картина, степента на развитие на усложненията на черния дроб и прогнозата за бъдещия живот на пациента зависят от генотипа на причинителя. Генотипът на вируса е много важен още на етапа на диагностициране, тъй като комбинацията от лекарства и продължителността на терапевтичния курс, които трябва да се поставят на пациента, зависят от неговото правилно определяне.

Но дори и това привидно „перфектно“ лабораторно изследване има своите недостатъци:

• проучването възпроизвежда генетичния материал на всички патогени, дори неживи, които могат да нарушат резултата. Следователно, за да се следи ефективността с помощта на PCR, повторният анализ се извършва не по-рано от 2 месеца след предходния, така че мъртвите вируси да могат да „напуснат” тялото на пациента;
• част от вирусния геном, която се определя чрез тестови системи, теоретично може да присъства в други вируси или микроорганизми, така че има възможност за фалшиво положителен отговор;
• вирусите мутират бързо. Понякога скоростта и степента на вирусна мутация са толкова високи, че тестовата система спира да улавя генома им. В резултат на това е възможен фалшиво отрицателен резултат.

За изравняване на тези недостатъци производителите на лабораторни тестови системи за PCR диагностика постоянно провеждат тестовете си, включително кръстосани реакции и чувствителност към определен генотип на вируса.

Как да направите PCR тест за хепатит С?

За да бъде заключението на PCR изследването надеждно, е необходимо стриктно да се спазват правилата за подготовка за него:

• изследването се провежда на празен стомах (глюкоза, мазнини, минерали, които влизат в кръвта от храната, могат да повлияят на скоростта и качеството на ензимната реакция);
• разликата между последното хранене и вземането на кръвни проби за анализ трябва да бъде най-малко 8 часа;
• в навечерието на изследването е забранено да се приема алкохол и да се консумират мазни храни, периодът на елиминиране на който е удължен;
• ден преди да отидете в лабораторията трябва да избягвате силен физически и емоционален стрес;
• до момента на вземане на кръвни проби не се препоръчва да се пуши.

За да се избегне появата на неверни заключения, предполагаемият пациент трябва да дойде в лабораторията малко по-рано от вземането на кръв. Отнема 15-20 минути, за да може човек да си поеме дъх, да се успокои. Адреналинът, който присъства в кръвта след бърза разходка, може да повлияе на резултата от изследването.

Ако пациентът, отнесен за анализ, приема някакви лекарства, той трябва да уведоми лекаря за това. Възможно е някои от тях да бъдат отказани за известно време (ако е възможно).

Резултатът от анализа на PCR за хепатит С

Декодиране на резултатите от лабораторния лекар на лабораторията, която е извършила анализа. Декодирането е определянето на отклонението на резултата от нормата. Скоростта на индикаторите се определя директно от производителя на тестовата система, която се използва от лабораторията за диагностика. Следователно, не е изненадващо, че в някои лаборатории вирусният товар се определя в IU / ml, а в други в копия / ml.

След като получи заключението, е необходимо да можем да го тълкуваме правилно. Лечението на резултатите от изследването трябва да се извърши от лекуващия лекар на пациента с хепатит С. Само след обективно, инструментално и лабораторно изследване на пациента, лекарят може да получи достатъчно количество данни за правилна интерпретация на получените PCR резултати.

Оценката на качествения анализ, като правило, не предизвиква затруднения дори при пациентите. Резултатът може да бъде само един: "detected" или "not detected". В този случай втората от тях е норма.

Показателите за количествен анализ са по-трудни за тълкуване. Той показва степента на вирусно натоварване на пациента. Дори сред хепатолозите няма консенсус за това как да се лекува откритата виремия. Повечето лекари са склонни да смятат, че трябва да се обмисли високо натоварване от повече от 8 × 10 * 5 IU / ml. Натоварване, по-голямо от 1 × 10 * 7 IU / ml, се счита за много високо, докато ниското натоварване е по-малко от 4 × 10 * 5 IU / ml.

Степента на вирусно натоварване показва вирулентност (агресивност) на вируса: колкото по-голямо е количеството му в кръвта, толкова по-бързо се развиват усложненията на черния дроб. Високата концентрация на вируса в кръвта на бременна жена увеличава вероятността от проникване през хематоплацентарната бариера към плода. Виремията също влияе върху ефективността на лечението: при ниски цифри ефективността на терапията е по-висока, отколкото при високите.

За да бъдем уверени в точността на анализа на PCR за хепатит С, е необходимо да се даде предимство само на онези лаборатории, които са добре доказани. Ценовата политика в този случай не трябва да играе основна роля.

Използване на PCR диагностика

Полимеразната верижна реакция (PCR) в молекулярната биология е експериментален метод за откриване на вируси. Тя ви позволява значително да увеличите концентрацията на някои фрагменти от нуклеинови киселини (ДНК) в проби от биологичен материал, което дава възможност да се определят и разчетат.

Анализът се извършва, както следва. В тръбата се въвежда генетичен материал (кръвна проба), който потенциално може да включва желания ген. Има и поставени праймери - химически синтезирани сегменти с малка дължина на желания ген.

ДНК или РНК полимераза също се добавя към съда, тя е в състояние да издигне верига на нуклеинова киселина, която е напълно идентична с оригиналната. Полученият състав се инжектира и комплект от четири свободни нуклеотида - специален строителен материал за РНК или ДНК, единият от които съдържа радиоактивни фосфорни частици.

Получената смес се загрява до 95-96 ° С, поради което се тъкат две ДНК спирали, които обикновено се преплитат. След това лекарството се охлажда, през което време самите праймери се прикрепят към желаната област на вирусния геном, като по този начин предотвратяват повторното формиране на двойната спирала на РНК (или ДНК).

В процеса на охлаждане, полимеразата търси свободна нуклеотидна верига. За функционирането на този ензим е необходима единична верига от нуклеотиди. Тъй като полимеразата се плъзга по веригата на ДНК (като пръстен на въже), тя не е в състояние да работи на двойна спирала.

След това се извършва повторен цикъл на нагряване, поради което се разделят вериги от нуклеотиди. При всеки от тези цикли на PCR, количеството в пробата от желания ген на хепатита нараства експоненциално, а останалата част от генетичния материал се произвежда (расте) линейно.

След пречистване на разтвора от нуклеотидни остатъци и разделяне чрез електрофореза на ДНК вериги по параметър на молекулно тегло, лесно може да се определи дали има желан ген в изследваната проба или не.

Ползи от PCR

Лабораторните тестове с PCR позволяват да се получи още повече информация от наличието на вирусна РНК. Чрез определяне на параметъра за нивото на радиоактивното лъчение е възможно да се определи колко генетичен материал първоначално се съдържа в изследваната проба. В случай на хепатит, определете индикатора за нивото на вирусния товар.

Друго предимство на този метод е много високата степен на чувствителност на реакцията на CR. Тя е много по-висока от класическите методи за откриване на вируси. В идеалния случай, за да се идентифицира желания ген, за PCR, само един вирус в пробата е достатъчен.

В допълнение, PCR е напълно специфичен. Неговите праймери са конструирани по такъв начин, че те напълно съответстват на уникалните региони на желаните гени, които няма друга последователност. Подобно на пръстови отпечатъци, всеки ген има уникални последователности от нуклеотиди.

Качествен анализ на PCR

Качественият анализ показва само наличието на вируса в кръвта. Този тест трябва да се извърши за всички пациенти, при които са открити антитела срещу хепатит С в кръвта, което може да доведе само до една от двете стойности: „детектирано“ или „неоткрито“. При здрав човек нормата (референтната стойност) трябва да се „не открива”.

Има специална интерпретация на тези резултати от качественото изследване:

• Резултатът е "открит". Това означава, че в анализираната проба от взетия биологичен материал е намерен фрагмент от РНК, специфичен за вируса на хепатит C. Следователно, има факт, че пациентът е заразен с вируса на хепатит C. Ако резултатът от висококачествената PCR е "открит", това показва, че вирусът се умножава и по това време той заразява нови чернодробни клетки в тялото.
• Резултатът е "не е открит". Такава присъда показва, че в анализираната проба от получения биологичен материал в тази лаборатория не е намерен фрагмент от РНК, който е специфичен за вируса на хепатит C. Алтернативно, концентрацията на РНК на инфекцията на патогена в тази проба е под границата на чувствителността на теста.

В острата фаза на РНК на вируса на хепатит С, такива качествени проучвания по метода на PCR могат да бъдат открити още след 1-2 седмици непосредствено след заразяването на тялото, т.е. много преди появата на антитела към самия хепатит.

Ненадеждни резултати от изпитването на това изследване могат да бъдат получени чрез:

• замърсен биоматериал;
• наличието на хепарин в кръвта на пациента;
• присъствието в пробата на химични или протеинови вещества (инхибитори), които засягат различните компоненти на PCR.

За провеждане на качествен анализ на PCR не е необходима специална подготовка на пациента за изследването. Използваният материал е венозна кръв.

Оценка на резултатите

Висококачествените PCR тестове имат определена степен на чувствителност и в зависимост от точността на изследването и нивото на оборудване в лабораторията може да варира от 10 до 500 IU / ml.

Това означава, че ако вирусът в кръвната проба присъства в много ниска концентрация (по-ниска от праговата чувствителност на тази лаборатория), тогава резултатът за болния пациент може да бъде "неоткрит". Поради това, при провеждането на качествен анализ на PCR с ниско ниво на виремия (ниска вирусна концентрация), например за пациенти, подложени на антивирусна терапия, е много важно да се знае прага на чувствителност на тази диагностична система.

Варианти на диагностичните системи

За контролиране на вирусологичния отговор се препоръчва използването на диагностични системи с праг на чувствителност поне 50 IU / ml при провеждане на антивирусно лечение. Тези критерии са изпълнени, например, с анализатори на теста Cobas Ampicolor HCV (с точност до 50 IU / ml), както и с RealBest HCV РНК (с чувствителност 15 IU / ml).

Според препоръките на СЗО, за да се установи окончателна диагноза на хепатит С, е необходимо да се основава само на трикратно откриване на РНК на вируса С в серумните проби на пациента, при липса на други разновидности на маркери за хепатит.

В допълнение към PCR методите, TMA анализ (метод на транскрипционна амплификация) също се използва за откриване на HCV РНК при пациенти. Той има най-добрия праг на чувствителност (5–10 IU / ml), но в нашата страна такъв метод за изпитване все още не е много чест.

Обхватът на откритите модификации на вируса

Подобно качествено определяне в серума на присъствието на РНК на вируса на хепатит С дава възможност да се определят няколко генотипа на този вирус. В момента науката познава повече от шест генотипа на този вирус, както и около 10 подтипа на това заболяване.

В нашата страна, общи вируси 1, 2, 3 генотипа. Лабораториите могат да открият следните генотипи: 1а и 1b, 2а, 2б и 2с, както и 3, 4, 5а и 6, независимо от подтипове. За всички вирусни модификации, специфичността на откриване е 100%.

Количествен анализ на PCR

Като се използва количествен PCR тест, се определя нивото на концентрация на вируса на хепатит в кръвните проби (вирусен товар). Този тест за виремия (концентрация на вируса) ви позволява да определите броя на единиците на определен генетичен материал (самата вирусна РНК), която се открива в определено количество. В този случай се определя концентрацията му в 1 ml, което съответства на 1 cu. см.

Параметрите на количествения анализ са изразени в цифри, за тази цел като единица за измерване се използват международни единици (IU) на милилитър (ml), наричани IU / ml. Сега в някои лаборатории количеството на вируса може да се определи в други единици: броят на копията на ml се посочва като копия / ml.

• Дати При хепатит С такъв количествен анализ на PCR се извършва непосредствено преди началото на терапията. След това на 1, 4, 12 и 24 седмици. Оценката на 12-та седмица е показателна, тя позволява да се определи ефективността на терапията.
• Подготовка за анализ. За провеждане на количествен анализ на PCR не се изисква специална подготовка на пациента за изследването. Половин час преди вземането на проби не трябва да пуши. Венозна кръв се използва като лабораторен материал.

Оценка на резултатите

За различните лабораторни тестови системи има различни коефициенти на конверсия за този показател в IU / ml. Средно те приемат параметъра за конверсия, при който 4 копия / ml = 1 IU / ml. Например, ако лабораторията даде резултат от PCR анализ 2.4 * 10 6 копия / ml, тогава този параметър трябва да се раздели на 4 и ще получим 6 * 105 IU / ml.

Натоварване от 800,000 IU / ml се счита за високо, което приблизително съответства на 3,000,000 копия / ml. Ниска виремия, според някои автори, съответства на параметрите на количествената PCR под 400,000 IU / ml.

В резултат на количественото изпитване, крайните резултати могат да бъдат представени не под формата на цифрова стойност, а: „под диапазона на измерване“ или „не са открити“.

• Оценка: "под обхвата на измерване." Това показва, че количественият тест не успява да открие вирусна РНК на хепатит С, но самият вирус присъства в организма в много ниски концентрации. Това се доказва от допълнителния тест за качество, потвърждаващ факта на наличието на вируса.
• Оценка: не е открита. Този резултат показва, че количественият тест не е намерен в пробния РНК вирус.

Параметърът на вирусното натоварване, преди всичко, определя степента на инфекциозност на заболяването, нивото на "инфекциозност" на пациента. Колкото по-висока е концентрацията на вируса на пациента, толкова по-голяма е вероятността да го предадете на други хора. Например, по време на полов акт с болен човек или вертикално. Този количествен показател също помага да се определи ефективността на лечението на пациента.

Провеждането на количествен анализ на ККП е важно за антивирусната терапия, оценявайки нейния успех и планирайки продължителността на курса. Така, с бързата реакция на организма към лечението и ниската степен на виремия, продължителността на терапията може да бъде намалена.

Ако количественият параметър на PCR се понижи бавно, антивирусната терапия трябва да бъде удължена или модифицирана. Ако нивото на вирусното натоварване е ниско, то това е благоприятен фактор в терапията, а ако е повишен, използваният метод е неефективен и лекарствата или методите за тяхното използване трябва да се променят.

Качествен и количествен анализ на PCR за хепатит С: отрицателен, положителен, транскрипт

Хепатит С е вирусно чернодробно заболяване, причинено от флавивирус HCV (от английски вирус на хепатит С), чиято структура съдържа молекула на рибонуклеинова киселина (РНК). РНК носи генетичния код на вируса. Нейното присъствие позволява анализ на PCR за хепатит С. t

Опасността от HCV за човек се крие във факта, че така нареченият серологичен прозорец (времето между инфекцията и появата на реакция от имунната система) може да бъде доста дълъг - от няколко седмици до шест месеца.

Той не открива инфекция и започва лечението навреме.

В зависимост от индивидуалните особености на организма, носителят на HCV може да се прояви в остра форма, както и като хронично заболяване, което ще изисква дълго и скъпо лечение. При откриването на антитела срещу HCV се провеждат редица лабораторни тестове, включително PCR за хепатит С. Този тест се прави на всички хора, при които са открити кръвни антитела срещу HCV.

Какво е PCR анализ?

Лабораторни анализи на PCR за хепатит С - изследване на биологичен материал за идентифициране на наличието на флававирус.

Полимеразната верижна реакция (както означава абревиатурата) показва количествената стойност на вирусното увреждане на тялото, неговите качествени характеристики, както и генотипа на вируса, съдържащ РНК.

На тяхна основа, както и на базата на допълнителни анализи, се определя методът и продължителността на терапията, както и епидемиологичният фактор (степента на риск от предаване на друг носител).

Какво е хепатит С РНК анализ?

Хепатит С PCR се нарича също РНК анализ (HCV RNA), защото Флававирусът съдържа РНК частица с размер на вирион 30-60 nm. Една от особеностите на този микроорганизъм е високата склонност към мутации.

Всеки от подвидовете (генотипи) на вируса има различна резистентност, което причинява различни методи на лечение и естеството на по-нататъшната прогноза за пациента.

Биологичният материал (венозна кръв) се дава на празен стомах и, като правило, се изпитва чрез Real-Time PCR метод (високочувствителна в реално време диагностика с по-ниска граница на откриване от 15 IU / ml при използване на затворени автоматизирани системи).

Има и други тестове, например COBAS AMPLICOR с чувствителност от 50-100 IU / ml. За всеки лабораторен тест е важен прагът на чувствителност, т.е. способността на реагента да открива минималната концентрация на вирус в биологичния материал.

Видове анализи за хепатит С чрез PCR

Хепатит С PCR включва три важни компонента:

• качествен анализ;
• количествен анализ;
• определяне на генотипа.

Тези тестове могат да определят естеството на виремията, както и генетичните особености на патогена. В зависимост от чувствителността на диагностичната система, изследването се провежда веднъж, а понякога се прави втори тест с по-чувствителен реагент, за да се потвърдят или подобрят резултатите.

Висококачествен PCR хепатит С

Анализът на хепатит С PCR е качествен е друго общоприето име за анализ на полимеразната верижна реакция. Стандартната чувствителност на теста, която позволява да се открие наличието на вирусни лезии, е в границите на 10-500 IU / ml.

Отрицателен PCR анализ за хепатит С показва, че концентрацията на вируса в кръвта на пациента е под прага на чувствителност на диагностичната система.

Ако висококачествената PCR даде отговор "не се открива", то за последващо лечение е важно да се установи прагът на чувствителност на реагента.

Протеиновите фракции на флававирус се появяват много по-късно.

Количествен PCR за хепатит С

Хепатит С PCR е количествен показател за вирусното натоварване, което отразява нивото на концентрацията на флававирусна РНК в организма. Това е индикатор, който показва колко фрагменти от вирусна РНК се съдържат на кубичен сантиметър кръв. Резултатите от PCR на хепатит С РНК в количествен тест в конвенционалната система са показани в международни единици на милилитър (IU / ml) и могат да бъдат записани по различни начини, например 1.7 милиона или 1.700.000 IU / ml.

Количествена PCR диагностика на хепатит С се предписва на пациентите преди началото на антивирусното лечение и на 12-та седмица от лечението, за да се оценят резултатите от избрания метод за справяне с HCV. Вирусният товар позволява да се определят три важни показателя за заболяването:

• инфекциозност, т.е. степента на риск от предаване на вируса от един носител на друг (колкото по-висока е концентрацията на флававирусна РНК, толкова по-голяма е вероятността да се зарази друг човек, например чрез сексуален контакт);
• метод и ефективност на лечението;
• продължителността и прогнозата за антивирусна терапия (колкото по-висок е вирусният товар, толкова по-дълго продължава лечението).

Количествена PCR диагностика на хепатит C зависи от вида на лабораторния тест и прага на неговата чувствителност. Долната граница на нормата се счита за показател до 600.000 IU / ml, средната стойност е в рамките на 600.000-700.000 IU / ml. Резултатите от 800.000 IU / ml и по-горе се считат за високи нива на РНК-съдържащ вирус.

определяне на генотипа

Поради високата мутационна активност на HCV в природата, при тестване е важно да се определи кой вирусен генотип е в кръвта на пациента. На планетата са регистрирани общо 11 генотипа на вируса на хепатит С, които включват много подвидове (подтипове). На територията на Руската федерация се разпределят 1,2 и 3.

Хепатит С PCR РНК заедно с генотипирането е много важен компонент на анализа, тъй като позволява на лекаря да определи резистентността (резистентността) на вируса, да избере подходящите лекарства и да предпише курс на лечение.

Генотипирането също позволява непряко определяне на състоянието на черния дроб. Например, генотипът 3 на HCV често е придружен от стеатоза, при която мазнините се натрупват в клетките на органа.

Кръвен тест за PCR за хепатит С трябва да произведе цифра, която определя генотипа. Лабораторните отговори могат да кажат „не типично” - и това означава, че вирусът е в човешката кръв, който не се открива от тестовата система. Това може да показва, че генотипът не е типичен за дадена географска област. В този случай трябва да повторите анализа с по-висока чувствителност на диагностичната система.

Декодиране на PCR анализ за хепатит С

Тестът за количествено декриптиране на хепатит С PCR може да се основава на горните данни. При получаване на резултатите от лабораторните тестове обикновено се пишат следните данни:

• "Намерен" / "не е намерен" (висококачествен PCR за хепатит С);
• броя на RNA-съдържащите фракции, например 831.680 ME / ml (количествен PCR анализ);
• цифрата, която определя генотипа на HCV, например - 1, 2, 3, 4;
• Името на теста е най-често в реално време.

Най-важното при дешифрирането на PCR анализа за хепатит С е втората точка, която показва вирусния товар, който определя прогнозата, метода и продължителността на лечението.

Ако PCR тестът за хепатит С е отрицателен и ELISA е положителен - какво означава това?

За дешифриране на лабораторните тестове е важно да се свържете с хепатолог или специалист по инфекциозни болести, който ще обясни получената информация в съответствие с вида на диагностичната система и нейния праг на чувствителност. В медицинската практика има много данни за кръвни изследвания, които могат да заблудят човек без медицинско образование.

Например, ако тестът за хепатит С PCR е отрицателен и ELISA е положителен, това може да означава, че няма HCV в кръвта на пациента в момента, но преди това е преживял остра форма на хепатит С. Счита се, че положителен ензимен имуноанализ (ELISA) показва, че в кръвта има антитела, които са произведени след инвазията на вируса в миналото. Но в съвременната медицинска практика анализът ELISA се счита за недостатъчно надежден и често дава нетипични резултати, така че лекарите го използват като първичен скрининг. При диагностициране на заболяване специалистите се ръководят именно от PCR тестове.

Полезно видео

Следният клип разказва по много подробен и интересен начин каква е същността на PCR метода, как се извършва анализът:

заключение

За анализ на PCR на хепатит С обикновено се взема венозна кръв. Най-често има двойно поемане на биологичен материал - за ELISA, и директно за PCR тест. За правилни резултати от изпитванията се изисква съответствие с основните правила за лабораторно събиране на биологичен материал:

• кръв за анализ се дава през първата половина на деня на празен стомах;
• между хранене и вземане на кръв трябва да отнеме поне 8 часа;
• Алкохолът и пържените храни също трябва да бъдат изключени преди теста.
• в деня преди кръводаряване е необходимо да се избягва високо физическо натоварване.

Резултатите от кръвните тестове обикновено са готови на следващия ден.