Скоростта на количествения анализ за хепатит В

Наличието на съвременни лекарства против хепатит В (HBV) с ясни индикации за тяхното прилагане изисква точна и бърза проверка на диагнозата. Въпреки това, поради оскъдните клинични данни през първите седмици на болестта и методите за анализ с ограничен имуноанализ, степента на диагностициране намалява.

Наличието на маркери анти-HBc IgM, HBsAg, анти-HBc, HBeAg, anti-HBe ви позволява да потвърдите HBV или да установите факта на предишно заболяване. Но е възможно да се определи наличието на активни вирусни частици в кръвта и да се преброи техния брой по време на изследването чрез PCR - количествен тест в реално време за откриване на хепатит В. Методът, в сравнение с диагностичните методи ELISA, разрешава диагностични проблеми и позволява да се предвиди хода на заболяването при получаване антивирусни лекарства.

Основи на диагностиката на заболяванията

Диагностиката на хепатит В се основава на оценката на клиничните прояви, ензимните имуноанализи и инструменталните методи на изследване. Заболяването настъпва в острата фаза след инкубационния период и в зависимост от дозата на инфекцията и ефективността на лечението навлиза в хроничен стадий. Основната цел на лечението е да се предотврати хронизацията, т.е. елиминирането на всички вирусни частици от кръвта. Клиничното протичане на заболяването е лек без последваща виремия.

Фактът, че се елиминира инфекцията, трябва да се докаже чрез количествен метод на изследване.

Тъй като всеки качествен ензимен имуноанализ дава възможност за диагностициране на HBV индиректно, т.е. не показва присъствието на патогена във вътрешната среда на тялото, но характеризира имунния отговор към инфекцията, следи ефективността на терапията и фактът, че лечението е трудно, се доказва. Ето защо, пациентът с хепатит B или с наличието на диагностични критерии в негова полза трябва да се извърши полимеразна верижна реакция, за да се определи количествено броя на вирусните частици в кръвта. Диагностичната честота е липсата на копия на ДНК на инфекцията.

Описание на диагностичния метод

Високо чувствителният метод на PCR диагностика на хепатит В принадлежи към категорията на генетично инженерните молекулярно-биологични изследвания. Чрез нея се определя количеството вирусна ДНК в биологичния материал на пациента и допустимата скорост. Според получените резултати се установява броят на вирусните частици на единица обем. Материалът за диагностичния тест е венозната кръв на пациента. Приемът е желателен на празен стомах поради възможния ефект на chyle серум върху резултата от изследването.

Получените резултати трябва да бъдат предоставени на лекаря за интерпретация и определяне на по-нататъшна тактика. Независимото декодиране не представлява диагностична стойност.

Значимостта на резултата от броя на вирусните частици, получени по метода на PCR, надвишава стойността на ензимните имуноанализи. Тъй като анализът в режим на реално време показва наличието на причинител на заболяването в кръвта, неговото информационно съдържание е по-високо от другите. Ако ELISA показва само наличието на антитела, които се наблюдават от 4 седмици на инкубационния период и трае повече от 8 седмици след елиминирането на вируса от кръвта, то полимеразната верижна реакция ясно потвърждава активния ход на заболяването или неговото лечение, характеризира динамиката на предписаната терапия.

Полимеразната верижна реакция с количествено определяне на патогенни частици решава диагностични въпроси в полза на спиране на лечението поради възстановяване или продължаване на лечението поради липсата на ефективност. Методът е възможно най-специфичен за HBV вируса и се отличава с приемлива грешка.

Показания и цели за изпълнение

Количественият анализ на хепатит В е най-надежден и ви позволява да потвърдите данните, получени по методите ELISA. Той е назначен, когато:

  1. получаване на положителен диагностичен резултат от ELISA;
  2. лечение на пациент с установена диагноза на вирусно увреждане на черния дроб;
  3. в диагностиката на хепатит смесена етиология;
  4. ако е необходимо, определете вирусния товар при пациент.

Тъй като методът на ензимния имуноанализ се използва по-широко в практиката на специалист по инфекциозни заболявания, някои пациенти с леко заболяване могат да бъдат лекувани без да се налага да преброяват вирусния товар. Но PCR обикновено се счита за „златен стандарт“ на диагностиката в хепатологията, тъй като поради уникалността на неговия резултат, тя премахва редица организационни въпроси. Следователно, насоката на пациента за количествен анализ има следните цели:

  • получаване на данни за броя на вирусните частици в кръвта на пациента;
  • потвърждение на острия ход на хепатита и навременната проверка на хроничното заболяване;
  • постоянно откриване на латентни носители на вируси с положителни ELISA тестове, наблюдение на тяхната виремия;
  • вземане на решение за назначаване на антивирусно лечение, неговото комбиниране и прекратяване.

Най-важната цел на прилагането на количествен PCR тест за откриване на HBV е да се идентифицират възможни комбинации от лечението. В случаи на висок вирусен товар резултатът от анализа дава възможност на специалиста да продължи с комбинацията от лекарства. По време на терапията е лесно да се определи ефективността на предписаното фармакологично лечение въз основа на резултата от PCR. Водени само от данните от имунологичните методи, не е възможно да се определи своевременно факта на лечение и неговата настояща ефективност. Следователно, количествен тест в реално време е необходим анализ преди започване на лечение за остър хепатит, латентна вирусна инфекция с висока виремия и хроничен HBV.

Интерпретиране на количествените резултати от PCR теста

Интерпретацията на резултатите от количествения PCR тест трябва да се извърши от лекуващия лекар на пациента. Необходимо е да се направи оценка на диагностичния индикатор и да се определи терапевтичната тактика.

Стандартният анализатор е в състояние да произведе количествен показател, който отразява броя на копията на вирусната ДНК, намираща се в изследваната венозна кръв. Мерни единици - копия / ml, IU / ml (копия на милилитър, международни единици на милилитър). Интерпретацията на резултатите е дадена в таблицата с посочване на различни мерни единици.

Дешифриране на кръвен тест за хепатит В

Хепатит В е една от най-опасните заболявания на нашето време.

Тя се причинява от вирус, който влиза в тялото, когато кръвта влезе в контакт със заразения биологичен материал, включително и тези, които остават върху аксесоарите за маникюр, медицинските инструменти, машините за татуиране, които не са дезинфекцирани по подходящ начин. Вирусът може да се предава и чрез сексуален контакт.

Хепатит В се анализира за диагностициране на заболяването, като се взема кръвта на пациента.

Инфекцията възниква чрез сексуални и вътрешни пътища, видът на разпространение е хематогенен (чрез кръв). Когато се зарази, вирусът навлиза в хепатоцитите (чернодробни клетки), който се произвежда в бъдеще. Чрез кръвообращението болестта бързо се разпространява в тялото. Вирусът В (HBV) се характеризира с висока устойчивост на въздействието на температурата и киселината и е в състояние да поддържа своите вредни свойства в продължение на шест месеца.

Какви кръвни тестове имате за хепатит В?

Ако хепатит В е показал първите симптоми, е необходимо да се преминат тестове преди започване на терапия и лечение. Анализът на кръвта е надежден метод за инсталиране на хепатит. Проведено в лабораторията. Тестовият материал за хепатит В се дава на празен стомах: минимум 8 часа трябва да премине от последното хранене.

За откриване на вируса на хепатит В в кръвта се използват три вида тестове, които характеризират наличието на вируса в кръвта:

  • анализ за наличието на HBV ДНК в материала чрез изследване на полимеразната верижна реакция;
  • качествено проучване на наличието на анти-HBc IgG протеин и HBsAg антиген (намерено при здрави, инфектирани и болни);
  • анализ за откриване на протеини HBeAg и Anti-HBc IgM (характеризират влошаването на заболяването).

За пълнота се препоръчва едновременно да се извършват изследвания върху няколко маркера.

Имунологични тестове за хепатит В

Най-честите тестове за хепатит В са имунологични. Тяхната същност е да откриват антитела в кръвта, произведени от тялото или черния дроб. Пробите са качествени и количествени. Тестовете за хепатит В и транскриптите обикновено съдържат информация за няколко характерни протеини. По време на теста се тестват следните антитела:

Това се случва в ранните стадии на инфекцията преди появата на клинични признаци.

Положителният маркер показва наличието на вирус, но се среща и при напълно здрави хора. Ако в кръвта има по-малко от 0,05 IU / ml, резултатът се счита за отрицателен. Ако концентрацията на антитялото е по-висока, анализът се счита за положителен.

Намира се на практика при всеки инфектиран пациент. Поддържането на показатели на високо ниво може да означава преход на болестта в хронична форма на курса. Положителният маркер показва наличието на болестта в периода на обостряне, продължително възстановяване. HBeAg е изключително лош знак. Пациентът е много заразен. Обикновено в кръвта не се открива протеин.

Съществуват два вида анти-HBc антитела: IgG и IgM. Наличието на IgM в кръвта е признак на протичане на острата форма, високата инфекциозност на пациента и възможността за прерохода на заболяването в хронична форма. Обикновено присъствието на IgM не е разрешено. IgG е благоприятен индикатор. Маркерът показва, че тялото формира имунитет срещу хепатит В.

Ако в кръвта се открие маркер, може да се направи извод за благоприятното протичане на заболяването и за формирането на защитен имунитет у пациента.

  • Анти-HBs.

Маркерът сигнализира за възстановяването и образуването на имунитет.

HBV DNA Detection чрез PCR

За лабораторно изследване и откриване на наличие на диагноза хепатит В в кръвта се използва методът PCR. Начинът, по който се счита полимеразната верижна реакция, е най-актуалната в областта на откриването на заболявания.

Крайното декодиране показва дали има следи от генното присъствие на патогена в чернодробните клетки.

Ако по време на изследването се следват всички принципи, резултатът е абсолютно точен. Методът се използва за диагностика, използва се в процеса на лечение и в антивирусна терапия.

  1. Висококачествената PCR в общото количество има само две значения: „детектирано“ и „неоткрито“. Процедурата се извършва за всеки пациент със съмнение за хепатит. При средна чувствителност на PCR теста в диапазона от 10 до 500 IU / ml, с ниски нива на вирусна ДНК в кръвта, не се открива генно вещество.
  2. Количествен PCR. За разлика от качествения, той показва не само хепатит В. Количественият анализ показва до каква степен нормата на здрав човек е далеч от показателите на пациента в цифров план. Методът позволява да се оцени етапа на заболяването и да се предпише лечение. Чувствителността на PCR теста при количествено следване е по-висока, отколкото при качествения метод. Основата е броят на откритата ДНК, която се изразява в копия на милилитър или IU / ml.

В допълнение, количествената PCR дава представа за ефектите от лечението и коректността на избраната терапия. В зависимост от количеството вирусен ген, може да се вземе решение за скъсяване на периода на лечение или, обратно, за удължаване и засилване на лечението.

Биохимичен кръвен тест за хепатит В

Методът на биохимичния анализ е необходим, за да се получи пълна клинична картина на хода на заболяването. Този диагностичен метод дава представа за работата на вътрешните органи (черния дроб, бъбреците, жлъчния мехур, щитовидната жлеза и др.). Декодирането дава разбиране за метаболизма в организма, за възможните патологии на метаболизма. Подробните показатели ще покажат липсата на витамини, макроелементи и минерали, необходими за човешкото здраве и живот.

Можете да направите тест за хепатит във всеки друг диагностичен център (Invitro, Gemotest и др.). Биохимичен кръвен тест за откриване на хепатит В включва следните компоненти.

Количествен анализ на ензима ALT (AlAt)

Този ензим най-често се среща в повишени концентрации при остър и хроничен хепатит. Веществото се съдържа в чернодробните клетки и с лезии на органи през кръвообращението навлиза в кръвоносните съдове.

Количеството и концентрацията в кръвта по време на вирусно заболяване постоянно се променя, така че изследванията се провеждат поне веднъж на тримесечие. ALT отразява не само активността на вируса на хепатита, но и степента на увреждане, причинено от него в черния дроб. Нивото на ALT се увеличава с увеличаване на количествата токсични вещества с чернодробен произход и в присъствието на вируса.

Количествен анализ на AST-ензим

Протеинът е съставна част от най-важните човешки органи: черен дроб, нервна тъкан, бъбречна тъкан, скелет и мускули. Ензимът участва в изграждането на най-важния мускул - сърцето. Високият AST при пациенти с хепатит В може да сигнализира за фиброза на черния дроб. Подобна ситуация се случва, когато алкохолно, лекарствено или друго токсично увреждане на чернодробните клетки.

Индикаторите за прегряване са признак за увреждане на черния дроб на клетъчното ниво. При поставяне на диагноза е необходимо да се вземе предвид съотношението между AST и ALT (коефициент de Rytis). Едновременното повишаване на концентрацията на двата ензима е признак на чернодробна некроза.

билирубин

Веществото се образува в далака и черния дроб в резултат на разграждането на хемоглобина в тъканите им. Този компонент е част от жлъчката. Има две протеинови фракции: директен билирубин (свързан) и индиректен билирубин (свободен). С увеличаване на свързания с кръвта билирубин има смисъл да се подозира хепатит или друго увреждане на черния дроб. Това е пряко свързано с цитолизата на чернодробните клетки.

Ако количеството на индиректния билирубин се увеличи, то най-вероятно е налице поражение на паренхимната тъкан или синдрома на Гилбърт. Високото ниво на билирубин според резултатите от анализа може да е следствие от обструкция на жлъчните пътища. Когато нивото на билирубина е повече от 30 микромола на литър, пациентът проявява иктеричен оттенък на кожата, урината става тъмна и бялото на очите променя цвета си.

албумин

Синтезът на този протеин се среща в черния дроб. Ако количеството му се намали, това показва намаляване на синтеза на ензими в организма, поради появата на тежки лезии на чернодробните клетки.

Общ протеин

Ако количеството на общия протеин стане значително по-ниско от приетата норма, то това показва забавяне във функционирането на черния дроб.

GGT (GGTP)

Ензим, използван за откриване на обструктивна жълтеница и холецистит. Увеличаването на нивото на GGT е сигнал за токсично увреждане на черния дроб. Може да бъде провокиран от хроничен алкохолизъм и неконтролирана употреба на наркотици. Протеинът е особено чувствителен към токсините и алкохола, под тяхното влияние активността му бързо нараства. Поддържането на висока концентрация на GGT в кръвта за дълго време говори за тежко увреждане на черния дроб.

креатинин

Той е продукт на белтъчния метаболизъм, който се появява в черния дроб. Рязък спад в нивото е сигнал, че органът се забавя

Протеинови фракции

Намаляването на нивото на протеиновите фракции е признак на чернодробна патология.

Декодиращият анализ за хепатит В и стойностите са нормални

Диагностицирането на хепатит В е кумулативно изследване на индикаторите. Само техният цялостен анализ позволява да се направят изводи за инфекцията на пациента. Помислете за декодиращия анализ за хепатит В. За сравнение, скоростта на веществата в кръвта.

Дешифриране на кръвен тест за хепатит В

В медицинския свят хепатит В се счита за един от най-опасните в наши дни.

Този вирус е способен да предава при контакт със заразена кръв - това могат да бъдат ножици за кутикулата в салона за нокти, медицински инструменти, по-специално инструментите на зъболекарите, които не са преминали необходимата стерилизация, или не е извършена по надежден начин. Освен това вирусът се предава по полов път.

За да се установи заболяването за хепатит В, пациентът трябва да вземе кръв за анализ.

Както е описано по-горе, вирусът може да се предава полово, чрез домакинствата, той принадлежи към хематогенния тип разпространение. Когато е заразен, вирусът навлиза в чернодробните клетки и оттам започва да се разпространява в цялото тяло. Вирусът се разпространява през кръвоносната система, той е изключително устойчив на температура и запазва способността си да уврежда живите клетки.

Какви кръвни тестове имате за хепатит В?

В случай, че човек е преживял първите симптоми на хепатит В, трябва незабавно да се консултирате с лекар и да се изследвате. При изследване на пациент се взима кръв, за да се тества. Кръвта се взема на празен стомах, последното хранене трябва да бъде преди поне 8 часа.

За да се установи наличието на болестта в човешкото тяло, е необходимо да се направят три вида кръвни тестове:

  • Полимеразната верижна реакция ще покаже дали има HBV ДНК в клетките;
  • Проучете присъствието на протеин и антиген в кръвта на пациента;
  • Анализите за наличието на протеин ще покажат обостряне на заболяването.

Лекарите много често провеждат клинични тестове върху няколко маркера, за да установят пълна картина на заболяването.

Имунологични тестове за хепатит В

През този период имунологичните тестове за хепатит В са надеждни, тестовете са насочени към откриване на антитела в кръвта, които се образуват в черния дроб. Обикновено тестването за хепатит В включва декодиране на събраните данни за отделните протеинови клетки. По време на теста обръщайте внимание на такива антитела:

  • HBsAg - те често могат да бъдат намерени в началото на инфекцията, дори преди болестта да се разбере. Положителният маркер показва, че човекът е заразен, въпреки че има случаи на положителен резултат при напълно здрав човек. Резултатите са отрицателни, когато в тялото на пациента няма повече от 0,05 IU / ml, с по-висока концентрация на антитела - анализът е положителен.
  • HBeAg - тези антитела се откриват при почти всички инфектирани пациенти. При дългосрочна висока концентрация на антитела в кръвта, заболяването става хронична форма. Положителният маркер означава обостряне на заболяването. Наличието на гореспоменатото антитяло в тялото на пациента показва, че заболяването прогресира и достига своя връх.
  • Анти-HBc има два типа антитела - l gG и lgM. Наличието на антитела lgM в кръвта предполага, че болестта достига до най-високата си точка и е в състояние да се превърне в хронична форма. Лекарите трябва да гарантират, че това антитяло не увеличава броя на кръвните му клетки. За щастие, LGG е добър, означава образуване на имунитет към вируса на хепатит В.
  • Анти-HBe-антитялото казва, че болестта протича по нормален начин и се образува имунитет към хепатит В в тялото на пациента.
  • Анти-HBs - това означава, че пациентът е здрав и имунната му система е значително по-силна.

HBV DNA Detection чрез PCR

За клинично проучване, което ще помогне да се определи дали пациентът е инфектиран с вируса на хепатит В, изберете метода CRC. PCR означава полимеразна верижна реакция, като я изследваме, за да определим наличието на вирус в тялото.

Резултатите от проучването помагат да се определи наличието на генен патоген в чернодробните клетки. При правилна процедура - резултатите се считат за надеждни.

  • Висококачествен RPC - положителен или отрицателен резултат. Тази процедура е задължителна за всички пациенти със съмнение за инфекция с хепатит В. В случай, че вирусът е в малки количества в ДНК клетките, той няма да бъде открит.
  • Количествен RPC. Това проучване ще покаже не само наличието или отсъствието на вируса, но и стадия на инфекцията. Чрез определяне на етапа на заболяването можете да назначите необходимия курс на медицинска терапия.

Наред с другите неща, ROC помага да се предпише точно лечението и дори да се коригира дозата на лекарствата. Определя се и продължителността на терапията, в някои случаи може да се прекрати предварително, а при други пациенти се изисква допълнителен курс на рехабилитация.

Биохимичен кръвен тест за хепатит В

За да се направи цялата картина на инфекцията и протичането на заболяването, е необходимо да се направи биохимичен кръвен тест. Това проучване ще помогне да се определи състоянието на вътрешните органи на пациента и как те функционират. Анализите дават обща картина на метаболитните процеси в организма, а също така говорят за скоростта на метаболизма.

Биохимичният анализ също така ще посочи всички витамини и микроелементи, които са необходими за нормалната борба на организма срещу болестта и за укрепване на имунната система.

Тестовете за хепатит В могат да се правят във всяка клиника, частна или обществена. Когато вирусът на хепатит В е открит в човешкото тяло, чрез биохимичен анализ има такива компоненти.

Количествен анализ на ензима ALT (AlAt)

Този ензим може да бъде намерен във високи концентрации, с развитие или хронична форма на инфекция с вируса на хепатит B. Ензимът е в клетките на черния дроб и поради кръвообращението се разпространява през всички съдове.

Концентрацията на веществото в организма непрекъснато се променя, поради това, което трябва да се извършва веднъж на тримесечие. Благодарение на АЛТ е възможно да се изследва не само активността на вируса, но и да се оцени степента на неговото отрицателно въздействие върху черния дроб и организма като цяло.

Количествен анализ на AST-ензим

Протеинът е едно от най-важните вещества в човешкото тяло, от него са изградени всички жизнено важни органи, включително сърцето. При болест на хепатит В висок процент на AST показва фиброза на черния дроб.

Високите стойности показват разрушаването на чернодробните клетки. За окончателната диагноза трябва да се има предвид съотношението между AST и ALT. При висока концентрация на двата ензима се развива чернодробна некроза.

билирубин

Хемоглобинът се разгражда в тъканите на черния дроб и далака, благодарение на което се появява вещество като билирубин. Този компонент е в основата на жлъчката. Билирубинът може да бъде директен и непряк. При висока концентрация на директен билирубин в кръвта е възможно да се установи инфекция с хепатит В или други чернодробни заболявания.

Високата концентрация на не-директен билирубин в кръвта говори за синдрома на Гилбърт. Освен това, високата концентрация на който и да е билирубин сигнализира за лоша проходимост на жлъчните пътища. Когато са заразени с хепатит, урината става тъмна, лицето и бялото на очите стават жълти.

албумин

Албуминът е протеин, който се синтезира в черния дроб. При ниски нива на този протеин в организма, чернодробните клетки са повредени.

Общ протеин

Намаляването на концентрацията на общия протеин в тялото на пациента показва нарушение на черния дроб.

GGT (GGTP)

Този ензим се използва от лекарите за откриване на жълтеница или холецистит. Повишените нива на GGT показват токсично увреждане на чернодробните клетки, което може да възникне в резултат на хроничен алкохолизъм или отравяне с лекарства. Протеинът е изключително чувствителен към алкохол и токсини и когато те са прекомерни, активността на протеина се увеличава.

креатинин

Протеиновият метаболизъм се появява в черния дроб и продуктът на този метаболизъм в медицината се нарича креатинин. Когато нивото на креатинина намалява, черният дроб се забавя.

Протеинови фракции

Ниското ниво на протеинови фракции показва ясно нарушение на черния дроб.

Декодиращият анализ за хепатит В и стойностите са нормални

За да се диагностицира вирус, е необходимо да се проведат редица различни изследвания. Резултатите от всички тестове в комплекса ще дадат ясна картина на заболяването.

Същността на анализа на PCR за хепатит B и неговите резултати

Вирусният хепатит В се лекува успешно, ако е открит навреме и броят на антителата и антигените в кръвта на пациента е правилно определен. С помощта на ензимен имуноанализ за хепатит е възможно да се открие наличието на вирусни маркери, но те не могат да определят точния етап на процеса.

За количествена оценка се използва PCR диагностика. С помощта на теста е възможно да се преброи броя на маркерите, да се предвиди хода на заболяването и вероятността от излекуване с помощта на антивирусни лекарства.

Основното предимство на изследването е способността да се открият дори минимални концентрации на вируса, за да се идентифицира патогенът на видовия етап.

Диагностика на хепатит В

Вирусът на хепатит В е силно заразен и устойчив на външни влияния. Той остава активен в кръвта на пациента в продължение на няколко седмици. Следователно, всеки човек е изложен на риск от инфекция, дори ако се наблюдава профилактика.

За диагностициране на заболяването се предписват следните изследвания:

Същността на PCR метода

Американският химик К.Мулис получи Нобелова награда и неговият диагностичен метод все още се използва.

Предшественик на PCR метода (полимеразна верижна реакция) се счита за учен от Норвегия H. Kleppe. Първоначално той започва да извършва усилване (възстановяване) на ДНК, използвайки къса верига от ДНК, т.е. синтетичен грунд (вид копие).

Ученият обаче не успя да реализира идеята си. Подобни проучвания са направени от американския химик К. Мюлис, който през 1993 г. получава Нобелова награда за изобретението си. Оттогава се използва PCR за установяване на бащинство, диагностика на генетични заболявания и откриване на вируси.

Същността на реакцията е, че с помощта на ензими се копира определена част от ДНК. Можете да копирате само областта, която съответства на посочените параметри и дали е в представената извадка. За започване на реакцията се използват следните компоненти:

  1. Матрична ДНК с място за копиране.
  2. Праймерите са сходни по структура с ДНК.
  3. Полимераза, т.е. ензимът, който задейства реакцията. Тя трябва да бъде термоустойчива, т.е. да издържа на температурни крайности.
  4. Разтвор с определени параметри, осигуряващ преминаването на реакцията.

Реакцията се провежда на няколко етапа:

За откриване на хепатит В се използват два вида реакции: количествен и качествен.

Количествен PCR

Количественият метод определя количеството на HBV генома

Количествената PCR включва едновременно създаване на копия на ДНК фрагменти и определяне на броя на молекулите. Измерването се извършва след всеки етап, т.е. в реално време. Това се постига чрез използване на флуоресцентни сонди, които са включени във верига от молекули и светят в определен период от изследването.

Този метод се използва за откриване на ДНК фрагменти, които са маркери на хепатитния вирус. С помощта на количествения метод е възможно точно да се изолира генотипа на вируса. С други думи, изчислява се броят на копията на HBV генома на брой клетки на пациент.

Количественият анализ дава отговори на следните въпроси:

  1. С каква интензивност болестта прогресира.
  2. Колко ефективно е лечението.
  3. Развила се лекарствената резистентност?

Също така, количественото измерване е необходимо за диагностицирането на хроничния стадий на инфекцията. Ако количеството на ДНК е под 100 бр / мл при нормално ниво на трансаминаза, тогава лицето е носител на вируса.

В острата фаза количеството на антителата е много по-високо, а при антивирусното лечение увеличаването на броя на антителата показва развитието на лекарствена резистентност, което е сигнал за коригиране на лечението.

PCR с високо качество

Висококачествената PCR дава по-малко информация, но може да елиминира инфекцията.

Висококачествената PCR може само да установи наличието на патоген в кръвта. Ако те липсват, пациентът не е заразен, ако патогенът влезе в кръвта, резултатът ще бъде положителен.

Въпреки това, с помощта на качествена реакция е невъзможно да се изясни геномът на вируса, стадия на заболяването. Следователно, за диагностициране на HBV се извършва количествено и качествено измерване.

Подготовка за проучването

За анализ на PCR е необходима венозна кръв. Това трябва да се направи сутрин на празен стомах.

Пациентът трябва да се подготви правилно за изследването:

  1. За 10 часа да откажете храна, можете да пиете само чиста вода.
  2. В навечерието на спрете приема на алкохол, в продължение на 4 часа да не се пуши.
  3. Преди преглед трябва да избягвате физически и емоционален стрес.
  4. Спрете употребата на лекарства в продължение на 2 дни, ако това не е възможно, е необходимо да уведомите лабораторния техник. Някои лекарства оказват влияние върху крайния резултат.

Тълкуване на данни

В количествена реакция, получените показатели се оценяват в зависимост от броя на ДНК копията.

Лесно е да се интерпретират данните за измерване на качеството. Той дава или положителен или отрицателен отговор.

В количествена реакция е възможно да се оценят получените индикатори в зависимост от броя на ДНК копия. Единица за измерване е копия / ml.

Данните се декодират както следва:

  1. Ако количеството на HBV ДНК е по-малко от 90, тогава инфекцията отсъства. Пациентът е развил имунитет след ваксинация или е бил излекуван от заболяването.
  2. Когато броят на копията 2x100 говори за носителя на вируса.
  3. Числото 2x106 показва хроничен стадий на заболяването.
  4. При ДНК повече от 2 х 109 пациентът има остър стадий на хепатит.

Грешни резултати

Предимствата на диагностичния метод при използване на полимеразни реакции са следните:

  1. Директно откриване на патогени. За разлика от това, ELISA предоставя информация за наличието на антитела към вируса.
  2. Специфика. Това е, че ДНК участъкът присъства в пробата от биоматериал, който се копира.
  3. Свръхчувствителност. Методът дори може да открие фрагменти от единични клетки.
  4. Диагностика на заболявания в остри и латентни стадии. Това означава, че е възможно да се диагностицира заболяването на етапа на предклиничните прояви.

Методът има недостатъци, които водят до фалшиви резултати. Най-същественият недостатък е вероятността от замърсяване на материала. Основният източник на замърсяване е слабо обработените тръби, лабораторните ръце, реактивите.

Част от ДНК от предишна реакция може да влезе в кръвта. Поради това на лабораториите се налагат повишени санитарни изисквания: отделни помещения, пластмасови тръби, ултравиолетово третиране на лаборатории и др.

Фалшиво негативните резултати могат да се дължат на намалена чувствителност на реакцията. Това се случва в следните ситуации:

  • пациентът приема лекарства, например антикоагуланти;
  • лицето е претърпяло физически стрес преди анализа (спортни занимания, упорита работа);
  • наскоро настъпи инфекция.

Ако пациентът има висока вероятност за инфекция и резултатът от проучването е отрицателен, той трябва да бъде преразгледан.

Вижте също:

заключение

Методът на полимеразната верижна реакция е основният и най-информативен за диагностицирането на HBV. Тя позволява не само да се установи статуса на носителя на инфекцията, но и да се изясни стадия на заболяването, да се оценят резултатите от лечението.

За по-точна диагноза се използва качествено и количествено измерване. Недостатъците на метода включват вероятността от замърсяване, намалена чувствителност и сравнително висока цена.

За да бъдат резултатите най-надеждни, трябва да се подготвите правилно за изследването и да го проведете в клиниката с подходящ лиценз и добра репутация.