Определянето на нарушенията на метаболизма на пигмента е от диагностичен интерес от две гледни точки: оценка на функционалното състояние на чернодробните клетки и диференциация на различни видове жълтеница (чернодробна, надхерпечна и субхепатална).
Изследванията на Talafant (1956) и Schmidt (1956) и работата на Billing, Lathe (1958) и Bollman (1959), които са използвали хроматографския метод за изследване на билирубин, позволяват да се открият отделните етапи на метаболизма на пигмента. Три различни форми на билирубина се определят чрез хартиена хроматография: свободен билирубин (не свързан с глюкуронова киселина), билирубин моноглукуронид и билирубиндиглукуронид *. Термините "директен" и "непряк" билирубин трябва да бъдат оставени, сякаш те не отразяват същността на процеса на промяна на билирубина. Според съвременните концепции, свободният билирубин, образуван във ВЕИ, е свързан с албумина и циркулира под формата на албумин-билирубинов комплекс в кръвта и навлиза в черния дроб. В клетките на Купфер комплексът се разпада, неразтворимият свободен билирубин навлиза в чернодробните клетки - хепатоцитите. В хепатоцитите с участието на трансферазни системи билирубинът е свързан с глюкуроновата киселина. Получените водоразтворими ди- и моноглукурониди се прехвърлят от чернодробните клетки към жлъчните капиляри. Повишената билирубинемия - жълтеница - може да се дължи на: 1) увеличаване на образуването на свободен билирубин в ретикулоендотелиума (хемолитична или надхепатична жълтеница); 2) обтурация на жлъчните пътища (субхепатална, обструктивна жълтеница); 3) увреждане на чернодробните клетки с увреждане на образуването на билирубинглюкурониди и освобождаването им в лумена на жлъчните капиляри (чернодробна жълтеница); 4) вродена недостатъчност на трансферазната система на чернодробни клетки с нарушено образуване на глюкуронид (вродена нехемолитична жълтеница).
При здрави индивиди в хроматограмите се определя само фракцията на свободния билирубин. При поражение на паренхима на черния дроб, заедно с увеличаване на количеството свободен билирубин, се появяват фракции на билирубиновите глюкурониди. Това показва наличието на синтез на глюкуронид в черния дроб и ретроградното постъпване на получените съединения в кръвния поток. Изследвания 3. D. Schwartzman (1961) показва връзка между степента на увреждане на чернодробния паренхим и промяната в съдържанието на отделните фракции на билирубина в кръвта.
Хемолитичната жълтеница се характеризира с увеличаване на общото количество билирубин, дължащо се главно на свободното. Понякога с хемолитична жълтеница се появява малко количество билирубин моноглюкуронид, което показва нарушение на функцията на чернодробните клетки. Сходни са промените при вродени нехемолитични и някои други видове жълтеница, свързани с нарушено образуване на глюкуронид поради недостатъчност на трансферазни системи.
В механичната жълтеница, хроматографското изследване показва увеличение на броя на трите фракции на билирубин, но за разлика от болестта на Боткин, няма характерен цикличен характер на заболяването при появата и изчезването на ди- и моноглукуронидната фракция. Появата на тези фракции при обструктивна жълтеница се дължи на нарушение на изтичането на жлъчката с продължаване на синтеза на глюкурониди.
Като тестове за определяне на чернодробната функция в областта на пигментния метаболизъм, заедно с определянето в кръвта на количеството на общия билирубин и неговите фракции, се определят билирубин в жлъчката, уробилин в урината и stercobilin в изпражненията.
При жлъчката се открива билирубин под формата на глюкурониди. Количеството му в дуоденалното съдържание варира драстично в отделните части на жлъчката, като концентрацията намалява с увеличаване на количеството на жлъчката. Съотношението на количеството моно- и диглюкуронид в жлъчката при здрави индивиди е 1: 3. Хроматографско изследване на дуоденалното съдържание на пациенти с болест на Боткин показва еднородно намаляване на двете фракции на билирубина при запазване на нормалното им съотношение; с увеличаване на възстановяването, освобождаването на моно- и диглюкуронид нараства (3. G. Bezkorovainaya, 1964).
Следващата стъпка в промяната на билирубина е образуването на тела на уробилин, които се определят в урината под формата на I-уробилиноген (мезобилубиноген), D-уробилиноген и L-уробилиноген (крайният продукт от промяната на билирубина). Пресните уробилини на урината бързо се окисляват до съответните уробилини.
По въпроса за мястото и механизма на образуване на тела на уробилин от билирубин понастоящем съществуват две теории: класическа чревна и дуалистична. Според класическата теория, трансформацията на билирубинлюкуронида в мезобилубрубиноген и уробилиноген се осъществява в дебелото черво под въздействието на бактерии. Малко количество от него се абсорбира, през системата на порталната вена навлиза в черния дроб и се екскретира отново в жлъчката и частично се разрушава. Уробилиногенът, който не се абсорбира под влиянието на микроби, претърпява допълнителна промяна и се превръща в stercobilinogen. Малка част от stercobilinogen се абсорбира в горната част на дебелото черво и влиза през порталната вена в черния дроб (и се унищожава там), докато от дисталната колона stercobilinogen, като се абсорбира, навлиза в хемороидалните вени в циркулацията и се екскретира с урината. Най-голямата част от стерикобилиногена се екскретира в изпражненията, превръщайки се в стеркобилин.
Според дуалистичната теория на Баумгартел, превръщането на билирубина в уробилиноген се извършва в червата и в жлъчните пътища: процесът на трансформация започва в долните участъци на жлъчните пътища и жлъчния мехур под влиянието на клетъчните ензими. По този начин, както билирубин, така и уробилиноген влизат в тънките черва, последният се абсорбира и през системата на порталната вена навлиза в черния дроб и се разпада там. Билирубин под въздействието на микрофлората на дебелото черво се превръща в мезобилубирубин, а след това в stercobilinogen. По-голямата част от stercobilinogen се екскретира в изпражненията, малка част се абсорбира и през хемороидалните вени навлиза в системната циркулация и се екскретира с урината.
Определянето на уробилин телата и stercobiogenogen в урината и изпражненията е от голяма диагностична стойност не само за откриване на лезии на чернодробния паренхим, но и за определяне на естеството на жълтеница.
Клиниката често използва техники, които определят общото количество stercobilin, stercobilinogen, всички форми на уробилиноген и уробилин. Терминът "уробилин" се отнася до вещества, съдържащи се в урината, терминът "stercobilin" - съдържащ се в изпражненията **.
Ако е засегнат чернодробният паренхим, един от ранните симптоми на заболяването е увеличаване на количеството уробилин в урината.
При обструктивна жълтеница присъствието на определено количество уробилин в урината в случай на пълно запушване на жлъчния канал се обяснява с образуването му в жлъчния мехур и интрахепаталните пасажи. Възможността за това се разпознава в тази ситуация от поддръжници на класическата теория, които обясняват този факт с появата на микрофлора в жлъчните пътища по време на стомаха на жлъчката. При продължително запушване на жлъчните пътища уробилинурията може да се увеличи поради развитие на увреждане на чернодробните клетки.
За диференциалната диагноза на естеството на жълтеницата, достъпен и ценен диагностичен метод е да се определи съотношението на количеството уробилин в урината и stercobilin в изпражненията.
При нормална дневна екскреция на stercobilin с изпражнения варира от 100-300 mg, надвишавайки количеството уробилин в урината с 10-30 пъти.
Когато чернодробната жълтеница се дължи на намаляване на билирубина с жлъчката, количеството stercobilin в изпражненията намалява; в същото време повишаването на уробилинурията се дължи на нарушение на трансформирането на телата на уробилин и stercobilinogen в хепатоцитите. Съотношението urobilin / stercobilin, равно на нормата 1: 10-1: 30, се променя на 1: 5-1: 1; при тежки лезии на черния дроб, коефициентът на уробилин е изкривен, достигайки 3: 1, т.е. дневната екскреция на уробилин в урината надвишава количеството stercobilin в фекалиите.
При хемолитична жълтеница, дължаща се на жлъчна плеохромия, количеството stercobilin се увеличава в някои случаи до 10 000 mg. Съотношението на количеството уробилин към стеркобилин може да достигне до 1: 300-1: 1000.
Определянето на коефициента на уробилин е ценен метод при диагностицирането на хемолитична жълтеница, но характерните промени в коефициента се определят само в началото на хемолитичната криза.
Ролята на черния дроб в пигментния метаболизъм
Помислете само за хемохромогенни пигменти, които се образуват в организма по време на разграждането на хемоглобина (в много по-малка степен по време на разграждането на миоглобина, цитохрома и др.). Разпадането на хемоглобина се наблюдава в клетките на макрофагите, по-специално в звездните ретикуло-ендотелиални клетки, както и в хистиоцитите на съединителната тъкан на всеки орган.
Както беше отбелязано (виж глава 13), началният етап в разпадането на хемоглобина е разчупването на един метинов мост с образуването на вердоглобин. Освен това, атомът на желязото и глобиновия протеин се отделят от молекулата на вердоглобин. В резултат се образува биливердин, който е верига от четири пиролови пръстена, свързани с метанови мостове. Тогава biliverdin, възстановяване, се превръща в билирубин - пигмент, отделен от жлъчката и поради това се нарича жлъчен пигмент. Полученият билирубин се нарича индиректен (неконюгиран) билирубин. Той е неразтворим във вода, дава непряка реакция с диазореактивен, т.е. реакцията протича само след предварителна обработка с алкохол.
В черния дроб билирубин се свързва (конюгати) с глюкуронова киселина. Тази реакция се катализира от ензима UDP-глюкуронилтрансфераза, докато глюкуроновата киселина реагира в активна форма, т.е. под формата на UDFGK. Полученият билирубин глюкуронид се нарича пряк билирубин (конюгиран билирубин). Той е разтворим във вода и дава директна реакция с диазореактивен. По-голямата част от билирубина се свързва с две молекули глюкуронова киселина, образувайки диглукуронидния билирубин:
Фиг. 16.4. Нормален обмен на уробилиногенни органи (схема).
Образуван в черния дроб директен билирубин, заедно с много малка част от индиректния билирубин се екскретира в жлъчката в тънките черва. Тук глюкуроновата киселина се отцепва от директния билирубин и възстановяването му се случва с последователното образуване на мезобилубин и мезобилиноген (уробилиноген). Смята се, че около 10% от билирубина се редуцира до мезолиогеноген по пътя към тънките черва, т.е. в екстрахепаталните жлъчни пътища и жлъчния мехур. От тънките черва част от формирания мезобилиноген (уробилиноген) се резорбира през чревната стена, навлиза в порталната вена и се пренася чрез притока на кръв към черния дроб, където се разделя напълно на ди- и трипсироли. Така мезосиногенът не влиза в общата циркулация на кръв и урина.
Основното количество мезобилиноген от тънките черва навлиза в дебелото черво и тук се възстановява до stercobilinogen с участието на анаеробна микрофлора. Сформираният stercobilinogen в долните части на дебелото черво (главно в ректума) се окислява до стерико-билина и се екскретира в изпражненията. Само малка част от stercobilinogen се абсорбира в системата на долната вена кава (тя първо влиза в хемороидалната вена) и впоследствие се екскретира с урината. Следователно, в нормалната човешка урина има следи от stercobilinogen (на ден се екскретира в урината до 4 mg). За съжаление, доскоро в клиничната практика stercobilinogen, съдържащ се в нормалната урина, продължава да се нарича urobilinogen. На фиг. 16.4 схематично показва начините за образуване на уробилиногенни тела в човешкото тяло.
Терминът "уробилинген урина" е пуснал корени в клиничната практика. Този термин трябва да се разбира като производни на билирубин (билиру-биноиди), които се откриват в урината. Положителната реакция към уробилиноген може да се дължи на повишено съдържание на този или онзи билирубиноид в урината и като правило е отражение на патологията.
Клиничното определяне на билирубин в кръвта (общо, непряко и пряко), както и уробилиноген в урината, е важно при диференциалната диагноза на жълтениците с различна етиология (фиг. 16.5). При хемолитична жълтеница ("свръххепатична"), поради повишена хемолиза на червените кръвни клетки и унищожаване на хемоглобина, интензивното образуване на индиректен билирубин възниква в ретикулоендотелната система (вж. Фиг. 16.5, б). Черният дроб не е в състояние да използва толкова голямо количество непряк билирубин, което води до неговото натрупване в кръвта и тъканите. В този случай, в черния дроб се синтезира повишено количество пряк билирубин, който с жлъчката навлиза в червата. В тънките черва се образува мезобилиноген в увеличени количества и впоследствие stercobilinogen. Абсорбираната част от мезобилиногена се използва от черния дроб, а резорбирането на стерокобилиноген в дебелото черво се екскретира с урината. По този начин, в типични случаи, хемолитичната жълтеница се характеризира със следните клинични и лабораторни показатели: повишени нива на общия и индиректен билирубин в кръвта, в урината - липсата на билирубин (непряк билирубин не се филтрира от бъбреците) и положителна реакция към уробилиноген (поради повишен проникване в кръвта и урината на stercobilinogen, и в тежки случаи - и поради mezobilinogen, който не се използва от черния дроб); лимонно-жълт цвят на кожата (комбинация от жълтеница и анемия); увеличаване на размера на далака; ярко оцветени изпражнения.
Фиг. 16.5. Патогенеза на билирубинемия при различни патологични състояния (схема). а е норма; b - хемолиза; в - претоварване на жлъчните капиляри; г - увреждане на паренхимните клетки на черния дроб; 1 - кръвен капиляр; 2 - чернодробни клетки; 3 - жлъчен капиляр.
При механична (обструктивна или субхепатална) жълтеница (вж. Фиг. 16.5, в) се нарушава изтичането на жлъчката (запушване на жлъчния канал с камък, рак на главата на панкреаса). Това води до деструктивни промени в черния дроб и навлизане на кръвните вещества в жлъчните вещества (билирубин, холестерол, жлъчни киселини). При пълно запушване на жлъчния канал, жлъчката не влиза в червата, следователно образуването на билирубиноиди в червата не настъпва, изпражненията се обезцветяват и реакцията към урилиногена на урината е отрицателна. По този начин, с обструктивна жълтеница в кръвта, количеството на общия билирубин се увеличава (поради директно), съдържанието на холестерол и жлъчни киселини се увеличава, а в урината - високо ниво на билирубин (директно). Клиничните особености на обструктивната жълтеница са ярко оцветяване на кожата, безцветни изпражнения, сърбеж на кожата (дразнене на нервните окончания с натрупани в кожата жлъчни киселини). Трябва да се отбележи, че при дългосрочна обструктивна жълтеница може значително да се наруши черния дроб, включително и една от основните - детоксикация. В този случай може да се получи частичен "провал" на черния дроб от индиректен билирубин, който може да доведе до неговото натрупване в кръвта. С други думи, повишаването на нивото на фракцията на индиректния билирубин при обструктивна жълтеница е лош прогностичен признак.
При паренхимна ("чернодробна") жълтеница (вж. Фиг. 16.5, г), която най-често се среща в вирусната лезия, развиват възпалителни и деструктивни процеси в черния дроб, което води до нарушаване на функциите му. В началните етапи на хепатит се поддържа процесът на улавяне и глюкурониране на непряк билирубин, но директният билирубин, образуван в условията на разрушаване на чернодробния паренхим, частично попада в системното кръвообращение, което води до жълтеница. Екскрецията на жлъчката също е прекъсната, билирубинът в червата става по-малко от нормалното. Мезобологенът се образува по-малко от обикновено и по-малко количество се абсорбира в червата. Въпреки това, дори това малко количество мезолиогеноген, влизащо в черния дроб, не се абсорбира от него. Мезобилиногенът, "избягващ", влиза в кръвния поток и след това се екскретира в урината, което определя положителна реакция към уробилиноген. Количеството на образувания stercobilinogen също се намалява, поради което изпражненията са хипохолични. Така че, с паренхимна жълтеница, има повишаване на кръвната концентрация на общия билирубин, главно поради прякото. В изпражненията се намалява съдържанието на стеркобиноген. Реакцията към уробилинагенната урина е положителна поради приема на мезобилиноген. Трябва да се отбележи, че при прогресиращ хепатит, когато черният дроб загуби своята детоксикационна функция, в кръвта се натрупва значително количество непряк билирубин. В допълнение, при изразено възпаление на черния дроб, неговото "подуване", компресия на жлъчните капиляри и канали може да се получи интрахепатален холестаза, която дава механични характеристики на паренхимната жълтеница с подходяща клинично-лабораторна картина (ахолни фекалии, липса на реакция към уробилиноген).
В раздела. 16.2 показва най-характерните промени в клиничните и лабораторни показатели за различните видове жълтеница.
Трябва да се има предвид, че на практика рядко се наблюдава жълтеница от всякакъв вид в „чиста“ форма. По-често срещана комбинация от един или друг тип. Така, при тежка хемолиза, различни органи неизбежно страдат, включително и черния дроб, който може да въведе елементи на паренхимна жълтеница по време на хемолиза. От своя страна, паренхимната жълтеница, като правило, включва механични елементи. При обструктивна жълтеница в резултат на притискане на главната дуоденална папила (Vater nipple) при рак на главата на панкреаса, хемолизата е неизбежна като последица от ракова интоксикация.
67. Изследването на пигментния метаболизъм в черния дроб, диагностичната стойност.
Отражението на пигментния метаболизъм в черния дроб е съдържанието в кръвта (както и в изпражненията и урината) на билирубина и неговите продукти за възстановяване. Идентифицирането на нарушенията на пигментния метаболизъм дава представа за функционалното състояние на геотоцитите, а също така спомага за диференцирането на различни видове жълтеница.
Образуването на билирубин става в ретикулоендотелните клетки на костния мозък, лимфните възли, но предимно в далака, както и в звездните ретикуло-ендотелиални клетки на черния дроб (Фиг. 117). Билирубинът се образува от хемоглобин, който се освобождава по време на физиологичното разграждане на червените кръвни клетки; в същото време, хемоглобинът се разпада в протеиновото тяло на глобина и желязото, съдържащо хем. В клетките на ретикулоендотелната система, свободният билирубин се образува от освободения хем, който циркулира в кръвта в нестабилна връзка с албуминовия протеин. Съдържанието на свободен билирубин в кръвта е 8.55-20.52 μmol / l (0.5-1.2 mg%). По-голямата част от него влиза в черния дроб, където се освобождава от асоциацията с албумин и с участието на чернодробни ензими се свързва с глюкуроновата киселина, образувайки водоразтворимо съединение, билирубинген-куронид (моно- и диглукуронид, или свързан билирубин), което се екскретира в жлъчните пътища.
Следователно, черният дроб участва в обмяната на билирубина, изпълнявайки следните функции: 1) образуването на билирубин в звездните ретикулоендотелни клетки; 2) улавяне на свободния билирубин от кръвта; 3) образуване на съединение с билирубин с глюкуронова киселина; 4) билирубиране на глюкуронидната секреция в жлъчката (свързан билирубин).
В кръвта на здравите хора е само свободен пигмент. При заболявания, които са придружени от нарушение или нарушаване на нормалното изхвърляне на жлъчния свързан билирубин, той влиза в кръвния поток и след това и двата пигмента циркулират в него (могат да бъдат определени отделно).
Качествена извадка на Van den Berg дава индикативна информация: ако се окаже непряка, можем да приемем, че в кръвта има само свободен билирубин; ако се окаже, че е пряк, тогава не е известно в какво отношение са двата пигмента - положителната пряка реакция маскира присъствието на всяко количество свободен билирубин. Понастоящем те използват предимно отделно количествено определяне на фракциите на билирубина. В по-голямата част от изследванията, проведени за тази цел, се използват същите диазореактиви, както и за качествения тест (диазореактивен I: 5 g сулфанилова киселина и 15 ml силна солна киселина се разтварят в дестилирана вода и обемът се довежда до 1 l с дестилирана вода; разтвор на натриев нитрит, смес от диазин: 10 ml диазореактивен I + 0,25 ml диазореактивен II).
Качествен тест: към 0,5 мл серум се изсипва 0,25 мл диазо смес. В случай на зачервяване на серума в рамките на по-малко от 1 минута, реакцията се счита за пряка и показва наличието на свързан билирубин в серума. Ако зачервяването настъпи бавно (в рамките на 1 - 10 min), което се случва, когато относително малко количество свързан билирубин е прикрепен към свободния, реакцията се счита за директно забавена. Ако няма зачервяване за повече от 10 минути, пряката реакция се счита за отрицателна. Ако искате да се уверите, че жълтият цвят на такъв серум зависи от билирубина, към него се добавя двойно количеството алкохол, филтрира се и се добавя диазо-смес към филтрата, в резултат на което течността става розова (непряка реакция). Съществуват много методи за количествено определяне на фракциите на билирубина. Някои от тях се основават на факта, че свободният билирубин е повлиян от такива вещества, като кофеинът, който се използва в най-разпространения метод на ендрашик, метилов алкохол и т.н., действа като катализатор, ускорител, придобива способността да реагира с диазореактанта. В първата част на серума, третиран с ускорителя, е възможно да се определи общото съдържание на двете фракции. В друга част, без добавяне на ускорител, се определя само свързаният пигмент. Изваждайки свързаната му фракция от общото количество билирубин, те ще разпознаят свободната фракция. Други методи за разделно определяне на фракциите на билирубина (химични, хроматографски) са по-сложни.
Свободният билирубин, неразтворим във вода, не се отделя чрез бъбреците; след свързване с глюкуронова киселина, тя става водоразтворима, когато се натрупва в кръвта - със субхепатална и чернодробна жълтеница, открива се в урината. В жлъчните пътища се освобождава само свързаният билирубин (билирубинглукуронид). В големите жлъчни пътища и жлъчния мехур (особено по време на възпалителни процеси в тях) и по-нататък в червата, малка част от билирубина се възстановява в уробилиноген, който се резорбира в горната част на тънките черва и влиза в черния дроб с кръвта на порталната вена. Здравият черен дроб напълно го улавя и окислява, но болният орган не може да изпълнява тази функция, уробилиногенът преминава в кръвта и се екскретира с урилина като уробилин. Уробилинурията е много фин и ранен признак на функционална чернодробна недостатъчност. Останалата част, голяма част от билирубина в червата се възстановява до стеркобининоген. Основната част от него се екскретира в изпражненията, превръщайки се в ректума и излизайки от нея (в светлина и въздух) в stercobilin, като придава фекалии на нормалния си цвят. Малка част от стеркобилиногена, абсорбирана в долните части на дебелото черво, през хемороидалните вени, заобикаляйки черния дроб, влиза в общата циркулация и се отделя от бъбреците. Нормалната урина винаги съдържа следи от stercobilinogen, който под действието на светлина и въздух се превръща в sterkobilin.
Съдържанието на телата на уробилина в урината се увеличава не само при недостатъчна чернодробна функция, но и при повишаване на хемолизата. В тези случаи, поради освобождаването на значително количество хемоглобин, се образува повече билирубин и се секретира в червата. Повишеното производство на stercobilin води до повишена екскреция в урината. В случай на обструктивна жълтеница, когато жлъчката изобщо не навлезе в червата, в изпражненията няма стеркобилин, няма уробилин в урината. Когато хепатоцелуларната жълтеница намалява отделянето на билирубин в жлъчката и количеството stercobilin в изпражненията намалява, а броят на уробилиновите тела в урината се увеличава. Съотношението им до 10: 1–20: 1 значително намалява, достигайки 1: 1 при тежки чернодробни увреждания, а при хемолитични жълтеници растежът на stercobilin в изпражненията значително надвишава увеличаването на отделянето на уробилиновите органи. Съотношението им се увеличава до 300: 1–500: 1. Съотношението на продуктите за възстановяване на билирубин в изпражненията и урината е много по-значимо в диференцирането на жълтениците от абсолютната стойност на всяка от тях.
Размяна на пигменти.
При физиологични условия концентрацията на плазмен билирубин е 0.3-1.0 mg / dL (5.1-17.1 μmol / l). Ако нивото на плазмения билирубин е около 3 mg / dl (50 μmol / l), то то се проявява клинично под формата на жълтеница склера, лигавици и кожа.
Билирубинът се получава от ензимно разрушаване на хемоглобин или хемопротеини (цитохром 450, цитохром В5, каталаза, триптофанпиролаза, миоглобин). След ензимното освобождаване на хем от хемоглобин или хемопротеини чрез микрозомална хемоксигеназа в мембраната на цитоплазмения ретикулум чрез активиране на кислород под въздействието на NADPH-цитохром с редуктаза, се образува агидроксихема, а активен кислород действа върху аметин мостове цикличен тетрапирол. Поради това протопорфириновият пръстен се разгражда с отделянето на въглероден оксид и се появява биливердин комплекс с желязо. След хидролиза на биливердин комплекса с желязо към желязо и биливердин IXa чрез биливердин редуктаза, централният метинов пръстен на биливердин се възстановява на биливердин IXa2, тъй като има три ензима (микрозомална хемоксиназа и NADPH-цитохром-c редуктаза, както и носител, и по същия начин ще можете да възстановите централния ензим в организма. хем, под формата на ензимен комплекс на повърхността на ендоплазмения ретикулум, биливердин на този комплекс се възстановява до билирубин.
Около 70% от дневно образуваните жлъчни пигменти възникват от хемоглобина по време на разграждането на червените кръвни клетки в ретикуло-ендотелната система (в далака, костния мозък и в черния дроб).
Участието на черния дроб в дневното образуване на билирубин е 10–37%, а в черния дроб основният източник са микрозомалните цитохроми, каталазата, триптофановия пиролаза и митохондриалния цитохром б. възприемат компонентите на heme за образуването на bilubin ruby.
След конюгация на билирубин, глюкуронираният билирубин, вероятно с помощта на носител, се секретира през мембраната на тубулата в жлъчката. Бромсулфалеин, индоцианан зелено и рентгеноконтрастните вещества на жлъчните пътища се конкурират за системата на транспортиране на билирубина в мембраната на жлъчния тубул, която следва кинетиката на насищане. Обратно, жлъчните киселини се циментират от друга транспортна система на мембраните на жлъчните пътища в жлъчката. В жлъчните пътища и в червата, секретираният билирубинлюкуронид не се абсорбира, а преминава през тънките черва и се хидролизира в крайната част на тънките черва и дебелото черво с помощта на бактериална v-глюкуронидаза. Билирубинът се възстановява от бактериите на дебелото черво до уробилиноген и частично се окислява до уробилин във фекалиите.По-малко от 20% от уробилиногена, произвеждан ежедневно в дебелото черво, се включва в ентерохепаталния цикъл: абсорбира се в тънките черва, транспортира се в жлъчката, докато останалите 10% се периферното кръвообращение и след това се екскретира в урината. При хемолиза, хепатоцелуларно чернодробно заболяване и портосистемен шънт, уробилин се екскретира с урината.
Урок 7.2. Пигментен обмен. Биохимия на черния дроб
Урок 7.2. Пигментен обмен. Биохимия на черния дроб.
-да изследва химическата структура, състава и функцията на хемоглобина;
-знае нивото на хемоглобина в кръвта;
-познават състава на хемоглобина при хора от различни възрастови групи;
-изучаване на процесите на синтез и разграждане на хемоглобина, формиране на ясни критерии за биохимична диференциация на жълтениците;
-познава съдържанието на кръв в общия билирубин и неговите фракции;
-да се запознаят с количественото определяне на хемоглобина в кръвта чрез хемоглобинцианиден метод;
-да могат да определят концентрацията на уробилин в урината с помощта на диагностични тест ленти "UBG-fan".
Необходима базова линия
От курса по биоорганична химия студентът трябва да знае:
-дефиниране и класификация на сложни протеини;
-структура на хема в хемоглобина;
-характеристика на глобиновия протеин в хемоглобина (особености на кватернерната структура).
От курса по физиология студентът трябва да знае:
-биологичната роля на хемоглобина и миоглобина.
Въпроси за самообучение
Биосинтез на хема, източници на желязо, регулиране на процеса Нарушения на биосинтеза на хемоглобина. Хемоглобинопатии. Серповидно-клетъчна анемия Хемоглобинов катаболизъм, разграждане на хема - образуване на билирубин в клетки от ВЕИ. Структура и свойства на индиректния билирубин. Неутрализация на билирубина в черния дроб. Конюгиран (директен) билирубин - механизъм на образуване, структура, свойства Екскреция на билирубин в червата и по-нататъшното му разпадане в червата: крайни продукти на катализма на билирубин Нарушения в метаболизма на билирубина (пигментния метаболизъм): жълтеница
Диагностичната стойност на определянето на билирубин в серума и урината. Уробилиноген в урината
Практическата част на урока
Лаборатория 1
Количествено определяне на билирубина в серума
Принципът на метода: диазореактивното дава директно оцветяване с розов билирубин. Косвеният свободен билирубин може да бъде превърнат в разтворимо състояние чрез добавяне на серумния кофеинов реагент, което увеличава разтворимостта на този пигмент и ви позволява да го определите с помощта на диазореактивен. Общото съдържание на двете форми на серумния билирубин е общият билирубин. Разликата между общ и директен билирубин може да се използва за определяне на нивото на индиректния билирубин. Интензитетът на цвета на разтвора, получен чрез добавяне на диазореактивен към серума, е право пропорционален на концентрацията на билирубина.
Напредък на работа: Изсипете 0,5 ml серум в 3 епруветки. В 1 епруветка (директен билирубин) 1,75 ml nat. разтвор, 0,25 ml диазореактант и се оставят за 10 минути. 1,75 ml от кофеинов реагент и 0,25 ml nat. разтвор. След 10 минути се измерва оптичната плътност на пробата върху фотоколориметър срещу вода в кювета на 5 mm със зелен светлинен филтър (530 nm). 1,75 ml от кофеинов реагент, 0,25 ml диазореактивен се излива в 3 епруветки (общ билирубин) и фотометрично се противодейства на водата след 20 минути. Изчислението се извършва съгласно калибрационния график. Намерете съдържанието на общ и директен билирубин. За да се определи съдържанието на индиректния билирубин от общия билирубин се изваждат показанията на директния билирубин. Коефициентът на преобразуване в единици SI (µmol / l) е 17,104.
Обикновено общото съдържание на билирубин е 3,5–20,5 µmol / l, свързано - 25% (до 7 µmol / l), свободно - 75% (до 12 µmol / l).
Лаборатория 2
Количествено определяне на уробилиноген в урината с помощта на диагностични ленти "UBG-fan"
Принципът на метода: методът се основава на реакцията на азо куплиране на стабилизирана диазониева сол с уробилиноген в кисела среда. В присъствието на уробилиноген, реактивната зона променя цвета си на розов или червен.
Напредък в работата: Реактивната зона на диагностичната тест лента се овлажнява с изследваната урина и след 30-60 секунди цветът на реактивната зона се сравнява с цветната скала.
Практическата значимост на работата. Определянето на общия билирубин и неговите фракции, както и билирубин и уробилиноген в урината, е важно за разбирането на механизмите на появата на жълтеници с различна етиология (хемолитична, паренхимна и обструктивна).
При хемолитична жълтеница хипербилирубинемията се дължи главно на непряк (свободен) билирубин.
Когато паренхимната жълтеница настъпва разрушаване на чернодробните клетки, екскрецията на директния билирубин в жлъчните капиляри се нарушава, тя влиза в кръвта, концентрацията му в кръвта се увеличава, а концентрацията на индиректен билирубин, хипербилирубинемия смесен тип. В урината се откриват уробилиноген и билирубин (билирубинурия).
В обструктивна жълтеница, билиарната екскреция е нарушена, което води до рязко увеличаване на съдържанието на директен билирубин в кръвта и, вследствие на билирубин, в урината, билирубинурия.
II. Окончателен тестов контрол на тема “Биохимия на кръвта. Размяна на пигменти "
Размяна на пигменти
Приблизително 80% от неконюгирания (непряк) билирубин е получен от разрушения хемоглобин, като около 35 mg билирубин произведен от 1 g хемоглобин. Разрушаването на остарелите червени кръвни клетки се случва в далака, костния мозък и черния дроб. Основната роля в унищожаването на червените кръвни клетки принадлежи на макрофагите; 20% от неконюгирания билирубин се синтезира от хем от друг произход (еритробласти, ретикулоцити, миоглобин, цитохром и др.). Той принадлежи към т. Нар. Шунт билирубин.
Само за един ден се синтезира около 300 mg билирубин. Неконюгиран (свободен или непряк) билирубин е практически неразтворим във вода, но разтворим в мазнини. При възрастен здрав човек, пигментът е изцяло свързан с албумин (транспортен лигандинов протеин). В тази форма тя не може да преодолее бъбречната и кръвно-мозъчната бариера. Един мол албумин свързва два мола билирубин. При значителна хипербилирубинемия (повече от 171,0–256,5 µmol / L или 10–15 mg / dL), албуминът няма достатъчно мощност и част от неконюгирания билирубин не е свързан. Същото се случва и с хипоалбуминемията, с блокада на албумина от мастни киселини и лекарства (салицилати, сулфонамиди и др.). При наличието на неконюгиран билирубин, който не е свързан с албумин, рискът от увреждане на мозъка се увеличава.
През последните години на глутатион трансферазата също е отредена основна роля в свързването и транспортирането на неконюгиран билирубин.
Неконюгиран (свободен, индиректен) билирубин, който влиза в кръвта в синусоиди чрез рецептори, се улавя от хепатоцити. Трябва да се отбележи, че неконюгираният билирубин под влиянието на светлината претърпява промени - образуват се фотоизомери и циклобилирубини, които могат да се отделят от жлъчката.
Вътреклетъчният транспорт на неконюгиран билирубин главно следва непряк път, т.е. използва се както цитоплазмата, така и GERL. Движението настъпва с използването на лигандини - транспортни протеини X и Y, както и глутатиотрансфераза. Движейки се по системата на GERL, неконюгираният билирубин навлиза в гладката ендоплазмена ретикулум. Тук с помощта на билирубин гликозилтрансфераза се осъществява конюгиране (съединение) на глюкуронова киселина и билирубин и се образува конюгиран (прав, свързан) билирубин.
Конюгираният билирубин е свързан с една или две молекули глюкуронова киселина. В първия случай това е билирубин моноглукуронид (около 15% от общия билирубин), а във втория - билирубиндиглукуронид (около 85% от общия билирубин). Билирубин моноглукуронид може да бъде частично формиран извън черния дроб. Известно е, че диглукуронидът има само чернодробен произход. Конюгираният билирубин е водоразтворим, но неразтворим в мазнини, може да проникне през бъбречната бариера. Този тип пигмент е сравнително малко токсичен за мозъка. Въпреки това, неговите високи стабилни концентрации повишават чувствителността на бъбреците към ендотоксини. По-лошо от неконюгирания билирубин, той се свързва със серумния албумин.
Създаденият конюгиран билирубин в гладката ендоплазмена ретикулум се транспортира активно до жлъчната мембрана на хепатоцита и след определени енергийни разходи (главно поради превръщане на АТФ) се екскретира в жлъчния капиляр. Този процес е компонент на жлъчната секреция. Малка част от конюгирания билирубин е показана в плазмата. Механизмът на това елиминиране (всъщност рефлукс) не е проучен достатъчно.
Системата на конюгация на билирубин в черния дроб обикновено използва около 2% от капацитета на хепатоцитите, екскрецията - 10%.
Bilirubinglyukuronid с жлъчка навлиза в червата. Чревните микроби, особено в дебелото черво, извършват отстраняването на глюкуроновата киселина и образуването на мезобилубин и мезобилиноген.
Следва възстановяването на мезобилубин и мезобилоген (уробилиноген). Част от мезобилинона се абсорбира в червата и през порталната вена навлиза в черния дроб, където е напълно разделен на дипироли. Когато паренхимът на черния дроб се повреди, процесът на разцепване на мезолиогена се нарушава и този пигмент навлиза в общия кръвен поток, а след това през бъбреците в урината.
По-голямата част от мезобилицина от тънките черва напредва в дебелото черво, където с участието на анаеробна микрофлора се възстановява до stercobilinogen. Основната част от последната в долната част на червата се окислява и се превръща в стеркобилин. 10-250 mg stercobilin се екскретира на ден. Само малка част от stercobilinogen навлиза в долната вена кава през системата на хемороидални вени и се екскретира през бъбреците чрез урината.
Под уробилинурия се разбира отделяне на уробилин-иди от урината. Urobilinoids включват уробилин (urobilinogen, urobilin) и stercobilin (stercobilinogen, stercobilin) органи. В клиничната практика тяхната диференциация не е широко разпространена. Urobilinogenuria и urobilinuria, от една страна, и stercobilinogenuria и stercobilinuria, от друга страна, са основно поради едни и същи химични вещества, които се срещат в две форми - редуцирани и окислени.
Хипербилирубинемията може да се развие главно поради неконюгиран билирубин, като например при болестта на Гилбърт (фамилна нехемолитична хипербилирубинемия или пигментна хепатоза), хемолитична анемия, някои форми на хроничен хепатит. Друга голяма група хипербилирубинемия се свързва с преобладаващо повишаване на концентрацията на конюгат-роверен билирубин и се среща при остър хепатит (вирусен, алкохолен, лекарствен), при остри обостряния на чернодробна цироза и хроничен хепатит, както и при субхепатална жълтеница, причинена от камък или тумор на големи жлъчни пътища. Определянето на съдържанието на конюгиран и неконюгиран билирубин е важно за диагностицирането на чернодробни заболявания, както и за проследяването им.
Катаболизъм на хемоглобина
Червените кръвни клетки имат кратък живот (приблизително 120 дни). При физиологични условия в тялото на възрастен човек се унищожават около 1 - 2 × 1011 еритроцити на ден. Техният катаболизъм се проявява главно в ретикулоендотелните клетки на далака, лимфните възли, костния мозък и черния дроб. Със стареенето на еритроцитите, съдържанието на сиалови киселини в състава на гликопротеините на плазмените мембрани намалява. Променените въглехидратни компоненти на гликопротеините на еритроцитните мембрани се свързват с рецептори на ВЕИ клетки и еритроцитите се „потапят” в тях чрез ендоцитоза. Разграждането на червените кръвни клетки в тези клетки започва с разпадането на хемоглобина в хема и глобина и последващата хидролиза от лизозомни ензими на протеиновата част на хемоглобина.
А. Катаболизъм на хем
Първата реакция на хема катаболизма се осъществява с участието на NADPH-зависим ензим
Фиг. 13-10. Регулиране на синтеза на рецептори на трансферин. И - с ниско съдържание на желязо в клетката, желязочувствителният протеин има висок афинитет към IRE mRNA, който кодира белтък на трансферинов рецептор. Добавянето на желязо-свързващия протеин към IRE mRNA предотвратява неговото разрушаване чрез РНКаза и синтеза на протеин трансферинов рецептор продължава; Б - При високо съдържание на желязо в клетката, афинитетът на желязо-свързващия протеин към IRE намалява и mRNA става достъпна за действието на RNAase, която я хидролизира. Разрушаването на тРНК води до намаляване на синтеза на протеинов трансферинов рецептор.
хемоксигеназен комплекс. Ензимната система е локализирана в мембраната на ER, в областта на електронните транспортни вериги на микрозомалното окисление. Ензимът катализира разцепването на връзката между два пиролови пръстена, съдържащи винилови остатъци - по този начин се разкрива структурата на пръстена (Фиг. 13-11). По време на реакцията се образуват линейни тетрапир-рол-биливердин (жълт пигмент) и въглероден моноксид (СО), които се получават от въглерода на метаниловата група. Хем индуцира транскрипция на гемоксигеназния ген, който е абсолютно специфичен за субекта.
Железни йони, освободени от разпадането на хем, могат да се използват за синтезиране на нови молекули хемоглобин или за синтезиране на други железо-съдържащи протеини. Biliverdin се редуцира до билирубин чрез NADPH-зависим ензим биливердин редуктаза. Билирубинът се формира не само при разграждането на хемоглобина, но и в катаболизма на други протеини, съдържащи хем, като цитохроми и миоглобин. С колапса на 1 g хемоглобин се произвежда 35 mg билирубин и около 250-350 mg билирубин на ден при възрастни. По-нататъшен метаболизъм на билирубина се наблюдава в черния дроб.
Фиг. 13-11. Разпадане на хема. М- (-СНз) -метилова група; В- (-СН = СН2) - винилна група; Р- (-СН2-СН2-СООН) е остатъкът от пропионова киселина. По време на реакцията една метилова група се превръща в въглероден монооксид и по този начин се разкрива структурата на пръстена. Биливердин, образуван от биливердин редуктаза, се превръща в билирубин.
B. Метаболизъм на билирубина
Билирубинът, образуван в клетки от ВЕИ (далак и костен мозък), е слабо разтворим във вода, транспортиран с кръв в комбинация с плазмен протеин албумин. Тази форма на билирубин се нарича неконюгиран билирубин. Всяка молекула албумин свързва (или дори 3) молекули на билирубин, една от които е свързана с протеин по-твърдо (по-висок афинитет) от другия. Когато рН на кръвта се измести към киселинната страна (увеличаване на концентрацията на кетонни тела, лактат), зарядът, конформационният албумин се променят и афинитетът към билирубина намалява. Следователно, албумин-свързаният билирубин може да бъде изместен
от местата на свързване и образуват комплекси с колагена на извънклетъчния матрикс и мембранните липиди. Редица лекарствени съединения се конкурират с билирубина за център на албумин с висок афинитет.
Поемането на билирубин от паренхимните чернодробни клетки
Комплексът албумин-билирубин, доставян с кръвния поток в хепат, дисоциира върху повърхността на плазмената мембрана на хепатоцита. Освободеният билирубин образува временен комплекс с липидите на плазмената мембрана. Светлинната дифузия на билирубина в хепатоцитите се осъществява с два вида протеини-носители: лигандин (транспортира основното количество билирубин) и протеин Z. Активността на поемане на билирубина от хепатоцитите зависи от скоростта на метаболизма му в клетката.
Лигандин и протеин Z също се откриват в клетките на бъбреците и червата, следователно, ако чернодробната функция е недостатъчна, те могат да компенсират отслабването на детоксикационните процеси в този орган.
Конюгиране на билирубин в гладка ER
В гладката ЕР на хепатоцитите, полярните групи, главно от глюкуроновата киселина, се присъединяват (реакция на конюгация) билирубин.
Фиг. 13-12. Билирубирана структура на диглюкуронид (конюгиран, "прав" билирубин). Глюкуроновата киселина е свързана чрез естерна връзка с два остатъка на пропионова киселина до образуване на ацилглукуронид.
водоразтворим конюгат - диглукуронид билирубин (конюгиран, или директен, билирубин) (Фиг. 13-12).
Донорът на глюкуронова киселина е UDP-глюкуронат. Специфични ензими, UDP-глюкуронилтрансфераза (уридин дифосфор глюкуронилтрансфераза) катализират образуването на моно- и диглукуронид билирубин (Фиг. 13-13). Някои лекарства, като фенобарбитал (виж раздел 12), служат като индуктори на синтеза на UDP-глюкуронилтрансфераза.
Секреция на билирубин в жлъчката
Секрецията на конюгиран билирубин в жлъчката следва механизъм на активен транспорт, т.е. срещу градиент на концентрация. Активният транспорт е вероятно ограничаващ скоростта етап на целия процес на метаболизъм на билирубина в черния дроб. Обикновено диглюкуронидният билирубин е основната форма на екскреция на билирубин в жлъчката.
Фиг. 13-13. Образуване на билирубиндиглукуронид.
присъствието на малко количество моноглукуронид. Транспортирането на конюгиран билирубин от черния дроб към жлъчката се активира от същите лекарства, които са способни да индуцират конюгацията на билирубина. По този начин може да се каже, че степента на конюгиране на билирубин и активния транспорт на билирубин глюкуронид от хепатоцити до жлъчка са строго взаимосвързани (Фиг. 13-14).
Б. Катаболизъм на билирубин-диглукуронид
В червата, билирубинните глюкурониди се хидролизират от специфични бактериални ензими β-глюкуронидази, които хидролизират връзката между билирубина и остатъка на глюкуроновата киселина. Освободеният от тази реакция билирубин под действието на чревната микрофлора се възстановява и образува група безцветни тетрапиролови съединения, уробилиноген (Фиг. 13-15).
В илеума и дебелото черво малка част от уробилиногена се абсорбира отново и влиза в кръвта на порталната вена в черния дроб. Основната част от уробилиногена от черния дроб в състава на жлъчката се екскретира в червата и се екскретира с изпражненията от тялото, част от уробилиногена.
Фиг. 13-14. Билирубин-уробилинигеновия цикъл в черния дроб. 1 - НВ катаболизъм в ретикулоендотелните клетки на костния мозък, далака, лимфните възли; 2 - формиране на транспортна форма на билирубин-албуминовия комплекс; 3 - получаване на билирубин в peHB; 4 - образуване на билирубинови глюкурониди; 5 - секреция на билирубин в състава на жлъчката в червата; 6 - катализъм на билирубин под действието на чревни бактерии; 7 - отстраняване на уробилиноген с изпражнения; 8 - абсорбция на уробилиногени в кръвта; 9 - абсорбция на уробилиноген от черния дроб; 10 - част от уробилиноген в екскрецията на кръвта и бъбреците с урината; 11 - малка част от уробилиноген, отделен в жлъчката.
Фиг. 13-15. Структурата на някои жлъчни пигменти. Мезобилиногенът е междинен продукт на катализма на билирубина в червата.
от черния дроб влиза в кръвния поток и се отстранява с урината под формата на уробилин (Фиг. 13-14). Обикновено повечето от безцветните уробилиногени, образувани в дебелото черво, под въздействието на чревната микрофлора, се окисляват в ректума до кафявия пигмент urobilin и се отстраняват с изпражненията. Цветът на изпражненията се дължи на наличието на уробилин.
Синтез на жлъчни киселини от холестерола и неговата регулация
Жлъчните киселини се синтезират в черния дроб от холестерола. Някои от жлъчните киселини в черния дроб се подлагат на реакция на конюгиране - съединения с хидрофилни молекули (глицин и таурин). Жлъчните киселини осигуряват емулгиране на мазнини, абсорбция на продуктите от тяхното храносмилане и някои хидрофобни вещества, идващи от храната, като мастноразтворими витамини и холестерол. Жлъчните киселини също се абсорбират, чрез юридическата вена отново се поемат в черния дроб и се използват многократно за емулгиране на мазнините. Този път се нарича ентерохепатална циркулация на жлъчните киселини.
Синтез на жлъчни киселини
В организма се синтезират 200-600 mg жлъчни киселини на ден. Първата реакция на синтез - образуването на 7-α-хидроксихолестерол - е регулаторна. Ензимът 7-а-хидроксилаза, който катализира тази реакция, се инхибира от крайния продукт, жлъчните киселини. 7-а-хидроксилазата е форма на цитохром Р450 и използва кислород като един от субстратите. Един кислороден атом от О2 е включен в хидроксилната група в позиция 7, а другият е редуциран до вода. Последващите реакции на синтез водят до образуването на 2 вида жлъчни киселини: холодна и хонодезоксихолична (Фиг. 8-71), които се наричат "първични жлъчни киселини".
Конюгиране на жлъчни киселини
Конюгиране - добавянето на йонизирани молекули на глицин или таурин към карбоксилната група на жлъчните киселини; повишава техните детергентни свойства, тъй като увеличава амфифилността на молекулите.
Конюгирането се осъществява в чернодробните клетки и започва с образуването на активната форма на жлъчните киселини, производни на CoA.
След това се добавя таурин или глицин и в резултат се образуват 4 варианта на конюгати: таурохолична и тауроенодезоксихолова, гликохолитна или гликогенодезоксихолова киселина (те са много по-силни емулгатори от първоначалните жлъчни киселини).
Конюгатите с глицин се образуват 3 пъти повече, отколкото при таурин, тъй като количеството на таурин е ограничено.
Ентерохепатална циркулация на жлъчните киселини. Трансформация на жлъчните киселини в червата
Продуктите на хидролиза на мазнини се абсорбират главно в горната част на тънките черва, а солите на жлъчните киселини - в илеума. Около 95% от жлъчните киселини, уловени в червата, се връщат в черния дроб през порталната вена, след което отново се секретират в жлъчката и се използват повторно в емулгирането на мазнини (Фигура 8-73). Този път на жлъчните киселини се нарича ентерохепатална циркулация. Всеки ден се реабсорбират 12-32 грама соли на жлъчните киселини, тъй като в тялото има 2-4 грама жлъчни киселини, а всяка молекула на жлъчната киселина преминава този стръмен 6-8 пъти.
Някои от жлъчните киселини в червата са изложени на бактериални ензими, които разцепват глицин и таурин, както и хидроксилната група в позиция 7 на жлъчните киселини. Жлъчните киселини, лишени от тази хидроксилна група, се наричат вторични. Вторични жлъчни киселини: дезоксихолична, която се образува от холосна и литохолна, която се образува от дезоксихоли, е по-малко разтворима, по-бавно се абсорбира в червата, отколкото първичните жлъчни киселини. Следователно, вторичните жлъчни киселини се отстраняват главно от фекалиите. Въпреки това, реабсорбираните вторични жлъчни киселини в черния дроб отново се трансформират в първични и участват в емулгирането на мазнини. През деня 500-600 mg жлъчни киселини се елиминират от организма. Пътят на екскреция на жлъчните киселини служи едновременно като основен път за отделяне на холестерола от организма. За да се компенсира загубата на жлъчни киселини с фекалиите в черния дроб, жлъчните киселини непрекъснато се синтезират от холестерола в количество, еквивалентно на получените жлъчни киселини. В резултат, резервоарът от жлъчни киселини (2-4 g) остава постоянен.
Фиг. 8-73. Ентерохепатална циркулация на жлъчните киселини. Светли кръгове - жлъчни мицели; тъмни кръгове - смесени мицели от жлъчката и продукти на хидролиза на триацил-глицерол.
Регулиране на синтеза на жлъчни киселини
Регулаторните ензими за синтеза на жлъчни киселини (7-а-хидроксилаза) и холестерол (HMG-CoA редуктаза) се инхибират от жлъчните киселини. През деня активността на двата ензима се променя по подобен начин, т.е. Увеличаването на количеството на жлъчните киселини в черния дроб води до намаляване на синтеза на жлъчните киселини и холестерола. Връщането на жлъчните киселини в черния дроб по време на ентерохепатичната циркулация има важен регулаторен ефект; прекъсване на циркулацията води до активиране на 7-α-хидроксилазата и увеличаване на улавянето на холестерол от кръвта. Този механизъм е в основата на един от начините за намаляване на концентрацията на холестерол в кръвта при лечението на хиперхолестеролемия. В този случай се използват лекарства, които адсорбират холестерола и жлъчните киселини в червата и предотвратяват тяхната абсорбция.
Регулирането на 7-α-хидроксилазата се извършва чрез други механизми:
фосфорилиране / дефосфорилиране и фосфорилираната форма е активна, за разлика от HMG-CoA редуктазата;
промяна в количеството на ензима; холестеролът индуцира генна транскрипция, а жлъчните киселини потискат. Синтезът на 7-α-хидроксилазата се влияе от хормони: тироидни хормони предизвикват синтез и естрогени репресират. Този ефект на естрогена върху синтеза на жлъчни киселини обяснява защо холелитиаза се появява при жени 3-4 пъти по-често от мъжете.