Принцип. Преброяване на левкоцитите по време на микроскопията в определен брой квадрати на броената камера и изчисляване на техния брой в 1 литър кръв, като се вземе предвид разреждането на кръвта и обема на броената камера.
Реагент: 3-5% разтвор на оцетна киселина, оцветени за оцветяване на ядра от левкоцити с няколко капки разтвор на метиленово синьо. Разтворът има син цвят, може да се съхранява дълго време.
Курсът на определяне. В суха епруветка се налива 0,4 ml разтвор на оцетна киселина. От пръста се събира 0,02 ml кръв (можете да използвате стабилизирана венозна кръв). Избършете върха на пипетата, след това издуйте кръвта от нея на дъното на епруветката, разбъркайте, наберете отново и издухайте сместа от кръв и реагент (пипетиране). Отбележете епруветката и я оставете до преброяването. Съхранявайте смес от кръв с разтвор на оцетна киселина се препоръчва не повече от 2-4 часа.
Кръвта се разрежда в епруветка с оцетна киселина, разбърква се добре и се напълва с броене. Напълнената камера се оставя в хоризонтално положение в продължение на 1 минута, за да се утаят белите кръвни клетки. Без да се променя хоризонталната позиция на камерата, те я поставят на масата на микроскопа и при ниско увеличение (окуляр 10х, обектив 8х) преброяват белите кръвни клетки в 100 големи квадрата, което съответства на 1600 малки.
За по-голяма точност левкоцитите се преброяват в мрежата на големи квадратчета, които не се разделят на малки квадратчета и ивици, започвайки от горния ляв ъгъл на решетката. За по-добър контраст, затъмнете зрителното поле, пуснете кондензатора и затворете отвора. Клетките, разположени вътре в квадрата и разположени върху две линии, се преброяват, за да не се брои два пъти една и съща клетка.
Изчисляването на броя на левкоцитите се извършва по формулата:
където X е броят на левкоцитите в 1 μl кръв; и - броя на левкоцитите в 100 големи квадрата; 20 - разреждане на кръвта; 100 е броят на големите квадрати; 250 е коефициентът на превръщане за 1 μl, тъй като обемът на един голям квадрат е 1/250 μl (страната на квадрата е 1/5 mm, височината е 1/10 mm).
На практика, за да се изчисли броят на левкоцитите в 1 μl кръв, броят им в 100 големи квадрата се умножава по 50, а в 1 литър - получената стойност се умножава по 106.
Забележка. При преброяване на левкоцитите, грешка е неизбежна в 6-8% от случаите.
- При голям брой нормоцити в периферната кръв те се броят в броя на левкоцитите (левкоцити и нормоцити - ядрени клетки). За да се установи правилно броят на левкоцитите, от общия брой ядрени кръвни клетки трябва да се извади броят на нормоцитите.
- Останалите грешки са сходни с тези, които възникват при изчисляване на броя на червените кръвни клетки в броената камера.
Брой левкоцити
Методът за броене във фотоапарата. Вземане и разреждане на кръвта, получена по тръбен метод. 0,4 ml от разредителната течност и 0,02 ml капилярна кръв се въвеждат в епруветката (за предпочитане Vidalevskaya). Полученото разреждане на практика се счита за 1:20, като обикновено се използва 3-5% разтвор на оцетна киселина, оцветена с метиленово синьо, като разредител (оцетната лиза на еритроцитите, метиленово синьо оцветява ядрата на левкоцитите). Преди попълване на камерата Goryaeva тръба с разредена кръв се разклаща добре. Камерата се пълни по същия начин, както при отчитането на червените кръвни клетки.
Левкоцитите са много по-малки от еритроцитите (1-2 на голям квадрат), следователно, за точност, броят се прави в 100 големи квадрата (неразпределени). Изчисление: 100 големи квадрата (1600 малки) се преброяват като левкоцити.
Помня, че обемът на малък квадрат е 1/4000 mm3, а кръвта се разрежда 20 пъти, броят на левкоцитите в 1 μl кръв се изчислява: 4000 20 и се разделя на 1600 = a x 1/2. Практически, за да се получи действителното съдържание на левкоцити в 1 μl кръв, достатъчно е да се разделят на половината от броя на получените в изчислението и се добавят 2 нули. Средната грешка на метода е ± 7%.
По-точна (2-3% грешка) и перфектна е броят на левкоцитите, използващи електронни устройства. Преброяването на левкоцитите в броячите на частици се извършва по същия принцип като еритроцитите. Предварителната кръв се разрежда и се смесва с всеки реактив, лизиращ червените кръвни клетки. В автоанализатора „Technicon“ се използва разтвор на оцетна киселина като такова в устройствата „Culter“ и „Celloskop“ - сапонин или сапоглобин, които се добавят разредени (1: 500, 1: 700) в изотоничен разтвор на натриев хлорид (6 капки на 20 ml). разреждане).
Броят на левкоцитите в кръвта се извършва в оцветени периферни кръвни натривки.
По-добре е да преброите най-тънката точка близо до края на размазването, най-малко 200 клетки (с изключение на изразената левкопения) и след това да получите процентното съотношение на някои видове бели кръвни клетки. Преброяването се препоръчва в същия ред: половината от клетките трябва да се преброяват най-отгоре, половината от дъното на инсулта, без да се стига до самия ръб и средата, зигзагообразно (3-4 зрителни полета по инсулт, 3-4 полета под прав ъгъл до средата на удара, след това 3-4 полета към страната, успоредна на ръба, отново под прав ъгъл нагоре и така до едната страна).
Приготвяне на натривки. Внимателно измитото и обезмаслено стъкло (ръбът му) докосва капка кръв на мястото на инжектиране. Намажете шлифовъчното стъкло, поставяйки го под ъгъл от 45 ° към плъзгача пред капката. След като са извадили чашата до тази капка, те чакат, докато кръвта се разпространи по ръба й, след това с бързо движение лесно извършват стъклото напред, без да я отнемат от обекта, преди да изсъхне цялата капка.
Правилно нанесена намазка има жълтеникав цвят (тънък), не достига краищата на стъклото и завършва с следи (мустаци).
Оцветяване на сухи мази, получени след предварителна фиксация. Най-добрата фиксация се постига в абсолютен метиленов алкохол (3-5 минути) или в смес от Никифоров от равни части абсолютен етанол и етер (30 минути).
Основните хематологични бои включват метиленово синьо и неговото производно - лазурно I (метиленово лазурно) и лазурно II (смес от равни части лазурно I и метиленово синьо), с кисел - водоразтворим жълт еозин.
● Живопис на Романовски-Гимзе. Романовски-Giemsa боя (фабрично произведени) има следния състав: Azur II - 3 г, водоразтворим жълт еозин - 0,8 г, метилов алкохол - 250 мл и глицерин - 250 мл. Работният разтвор на боя се приготвя в размер на 1,5-2 капки от готовата боя на 1 ml дестилирана вода. Боята се излива върху намазка с по-висок слой; време на оцветяване - 30-35 минути След този период тампоните се промиват с вода и се сушат на въздух. При този метод ядрото може да бъде добре диференцирано, но неутрофилната грануларност на цитоплазмата е много по-лоша, така че се използва широко за оцветяване на периферна кръвна мазка.
● Комбинирано оцветяване на May-Grunwald-Romanovsky-Giemsa според Папенхайм. Готово багрило, фиксатор Мей-Грунвалд, който е разтвор на еозинметилен синьо в метиленов алкохол, се пипетира върху фиксирана намазка в продължение на 3 минути. След 3 минути към боята, покриваща разтвора, се добавя еднакво количество дестилирана вода и оцветяването продължава още 1 минута. След това боята се измива и намазка се изсушава на въздух. След това изсушената намазка се пребояди с прясно приготвен воден разтвор на Романовска боя за 8-15 минути. Този метод се смята за най-добър, особено за петна от костен мозък.
Увеличаването на броя на левкоцитите в периферната кръв над нормалното ниво се нарича левкоцитоза, намаление се нарича левкопения. Левкоцитоза (левкопения) рядко се характеризира с пропорционално увеличение (намаляване) на броя на всички видове левкоцити, например левкоцитоза с удебеляване на кръвта. В повечето случаи има увеличение на броя (намаление) на всеки един клетъчен тип. Увеличаването или намаляването на броя на отделните видове левкоцити в кръвта може да бъде относително или абсолютно, в зависимост от общия брой на левкоцитите - нормален, повишен или намален. Промяната в броя, съотношението на отделните форми и морфологията на левкоцитите зависи от вида и вирулентността на патогена, естеството, хода и степента на патологичния процес, индивидуалната реакция на организма.
Метод за преброяване на левкоцитите в камерата на Горяев
Белите кръвни клетки - белите кръвни клетки - играят важна роля в антимикробната защита на организма. Гранулоцитите фагоцитират микробите и ги унищожават с помощта на ензими, затворени в гранули, лимфоцитите произвеждат антитела и осигуряват имунен отговор към тялото.
Методът за определяне на метода на епруветката: изсипва се в епруветка 0,4 ml разтвор на Türk (течката на Türk съдържа оцетна киселина за унищожаване на червените кръвни клетки и метиленово синьо за оцветяване на ядра от левкоцити). Използвайте капилярна пипета, за да изтеглите 0.02 ml кръв от прясна капка, внимателно я вдуйте в епруветка с реагент и изплакнете пипетата. Разбъркайте добре. В същото време, разреждането на кръвта е 20 пъти. Капка от разредена кръв се събира в края на кръгла стъклена пръчка и се прилага към ръба на полирана стъклена камера.
Преброяването се извършва в 100 големи безконечни квадрата, събрани от четири. Използва се малко увеличение.
Извличането на формулата за броене номер 1.
1. 100 квадрата съдържат 1600 малки квадратчета (16x 100)
2. Кръвен обем над малък квадрат 1/4000 mm3
3. Разреждане на кръв 20 пъти
Броят на левкоцитите в 1 μl кръв = при -4000-20. = Aх 50
Например: 130 левкоцити са преброени в 100 големи квадрата на мрежата на Горяев. В 1 μl кръв, броят на левкоцитите ще бъде 130 х 50 = 6500, или 6.5-10 3.
За да се определи съдържанието на левкоцити в 1 литър кръв, броят на левкоцитите, изразени в хиляди, трябва да се умножи по 10 9.
В нашия пример броят на левкоцитите в 1 литър кръв е 6.5-10 9.
194.48.155.245 © studopedia.ru не е автор на публикуваните материали. Но предоставя възможност за безплатно ползване. Има ли нарушение на авторските права? Пишете ни Свържете се с нас.
Деактивиране на adBlock!
и обновете страницата (F5)
много необходимо
Броят на левкоцитите в кръвта
Левкоцитозата може да бъде абсолютна (истинска) и относителна (редистрибутивна).
Абсолютна левкоцитоза се наблюдава при остри възпалителни процеси, тъканна некроза, остри бактериални инфекции (с изключение на коремен тиф, бруцелоза, туларемия и др.), Алергични състояния, злокачествени тумори (с разрушаване на тъканите), затворени наранявания на главата и кръвоизливи в мозъка, диабет. уремична кома, шок, остра загуба на кръв, като първична реакция - с лъчева болест. С левкемия се наблюдава значително увеличение на броя на левкоцитите.
Относителна (редистрибутивна) е следствие от получаването на левкоцити в кръвния поток от органите, които служат за нейното депо. Това се случва след хранене (хранителна левкоцитоза), топли и студени вани, силни емоции (вегетативно-съдова левкоцитоза), интензивна мускулна работа (миогенна левкоцитоза) и др.
Левкопения. Левкопенията се разглежда като индикатор за инхибиране на функционалната способност на костния мозък в резултат на излагане на токсични вещества (арсен, бензен и др.), Някои медикаменти (сулфаниламиди, хлорамфеникол, бутадион, имуно, циклофосфамид и др.), Вируси (грип, вирусен хепатит)., морбили и т.н.), микроби (тиф, бруцелоза и др.), йонизиращо лъчение, рентгенови лъчи и хиперспленизъм (повишена функция на далака).
Левкоцитозата и левкопенията рядко се характеризират с пропорционално увеличение (намаление) на общия брой левкоцити от всички видове (например левкоцитоза с удебеляване на кръвта); в повечето случаи се наблюдава увеличение (намаляване) на броя на всеки един клетъчен тип, поради което се използват термините "неутрофилия", "неутропения", "лимфоцитоза", "лимфопения", "еозинофилия", "еозинопения", "моноцитоза", "моноцитопения"., "Басофилия".
При клиничната оценка на промените в броя на левкоцитите се отдава голямо значение на процентното съотношение на отделните форми на левкоцити, т.е. левкоцитна формула.
Левкоцитна кръвна картина на здрав човек:
Относителна сума Абсолютна сума
Базофили ……………………….0-1% 0-0.0650 x 10 9 / l
Еозинофили …………………….0.5-5% 0.02-0.30 x 10 9 / l
Неутрофили: - миелоцити... 0% отсъстват
- намушкан... 1-6% 0.040-0.300 х 109 / l
- сегментирани….47-72% 2.0-5.5 x 10 9 / l
Лимфоцити …………………………….19-37% 1.2-3.0 x 10 9 / L
Моноцити ………………………….3-11% 0.09-0.6 х 10 9 / L
Броенето на левкоцити се извършва при оцветени периферни кръвни натривки. За правилното тълкуване на резултатите от изследването на левкоцитната формула се препоръчва да се отчитат в абсолютни количества, но не и в относителни. Най-често срещаните методи за рисуване на мази от Романовски-Гимзе, Папенхайм. При потапяне се преброяват най-малко 200 клетки и след това се получава процентното съотношение на някои видове левкоцити. Анализът на левкограма, като се вземат предвид други кръвни параметри и клиничната картина, е ценен метод за изследване, помага при диагностициране и определяне на прогнозата на заболяването.
Основните причини за неутрофилия.
Остри бактериални инфекции - локализирани и генерализирани.
Възпаление или некроза на тъканта.
Лекарствени ефекти (кортикостероиди).
Основните причини за неутропения.
Инфекции - бактериални (коремен тиф, бруцелоза, туларемия, паратиф) и вирусни (инфекциозен хепатит, морбили, грип, рубеола и др.).
Миелотоксични ефекти и потискане на гранулоцитопоезата (йонизиращо лъчение; химични агенти - бензен, анилин, ДДТ; лекарствени ефекти - цитостатици и имуносупресори; витамин В12-фолиева киселина дефицитна анемия, остра алейкемична левкемия, апластична анемия).
Експозиция на антитела (имунни форми) - свръхчувствителност към лекарства, автоимунни заболявания (SLE, ревматоиден артрит, хронична лимфна левкемия), изоимунни прояви (хемолитична болест на новороденото).
Преразпределение и отлагане в органи - шокови състояния, заболявания със спленомегалия и хиперспленизъм.
Наследствени форми (фамилна доброкачествена хронична неутропения).
Основните причини за еозинофилия.
Паразитни инвазии (трихинелоза).
Хронични кожни лезии - псориазис, пемфигус, екзема.
Тумори (еозинофилни варианти на левкемия).
Други заболявания - фибропластичен ендокардит Lefflera, скарлатина.
В фазата на възстановяване на инфекциите и възпалителните заболявания (благоприятен прогностичен признак).
Причини за възникване на еозинопения (анеозинофилия).
Повишена активност на адренокортикостероиди в организма.
Основните причини за базофилията:
Хронична миелоидна левкемия и еритремия.
Основните причини за моноцитоза.
Субакутни и хронични бактериални инфекции.
Паразитни инфекции - лейшманиоза, малария.
Хемобластоза - моноцитна левкемия, лимфогрануломатоза, лимфоми.
Други състояния са SLE, саркоидоза, ревматоиден артрит, инфекциозна моноцитоза; в периода на възстановяване от инфекции, при напускане на агранулоцитоза, след спленектомия.
Намаляването на броя на моноцитите е важно главно при оценката на лимфоцитно-моноцитното съотношение при белодробна туберкулоза.
Основните причини за лимфоцитоза.
Инфекции - остър вирусен (инфекциозна мононуклеоза, морбили, рубеола, варицела), хронична бактериална (туберкулоза, сифилис, бруцелоза), протозойни (токсоплазмоза).
Хемобластоза (лимфоцитна левкемия, лимфом).
Други заболявания - хипертиреоидизъм, болест на Адисън, витамин В12-фолиева недостатъчност, хипо- и апластична анемия.
Лимфоцитопения се наблюдава при СЛЕ, болестта на Ходжкин, широко разпространена туберкулоза на лимфните възли, в крайния стадий на бъбречна недостатъчност, остра лъчева болест, имунодефицитни състояния, приемане на глюкокортикоиди.
Увеличаването или намаляването на броя на някои видове левкоцити в кръвта може да бъде относително или абсолютно. Ако само процентът на определен вид бели кръвни клетки се промени, тогава се наблюдава относителна неутрофилия, относителна еозинопения и др. Увеличаването или намаляването на абсолютното съдържание на всеки тип левкоцити, т.е. броя на тези клетки на единица обем кръв, се нарича абсолютна неутрофилия, абсолютна еозинопения и др.
Преместването на формулата наляво (увеличаване на броя на младите форми на неутрофили) е признак на възпаление или некротичен процес в организма.
Преместването на левкоцитната формула в дясно е характерно за лъчева болест и витамин-В12-фолиева киселина дефицитна анемия.
Отсъствието или значителното намаляване на броя на всички видове гранулирани левкоцити - гранулоцити (неутрофили, еозинофили, базофили) се определя от термина агранулоцитоза. В зависимост от механизма на възникване се разграничават миелотоксични (ефекти на йонизиращо лъчение, цитостатичен прием) и имунен (хаптен и автоимунен агранулоцитоза).
Левкоцити (левкоцити)
Левкоцити. Количествено определяне на левкоцити. Преброяване на левкоцити с помощта на камерата Горяева. Количествено съдържание на левкоцити. Левкоцитоза.
Бели кръвни клетки
Броят на левкоцитите в кръвта зависи както от скоростта на образуването им, така и от тяхната мобилизация от костния мозък, както и от тяхното използване и миграция в тъканите (до лезиите), улавяне от белите дробове и далака. Тези процеси, от своя страна, се влияят от редица физиологични фактори, и следователно броят на левкоцитите в кръвта на здравия човек е подложен на колебания: той се повишава до края на деня, по време на физическо натоварване, емоционален стрес, прием на протеинови храни и резки промени в температурата на околната среда.
Количествено определяне на левкоцити
Левкоцитите се преброяват с помощта на камерата Горяев и се използват автоматични броячи.
Преброяване на левкоцити с помощта на камерата Горяева
С in vitro метод за вземане на кръв за преброяване на левкоцитите:
- 0.4 ml от разтвор на 3-5% оцетна киселина, оцветена с метиленово синьо, се излива в епруветката. Използвайте капилярна пипета, за да изтеглите 20 μl кръв от прясна капка (разреждане 20 пъти), внимателно я издухайте в епруветка с реагент и изплакнете пипетата. Разбъркайте добре;
- чисто и сухо покривно стъкло се втрива в камерата, така че дъговите пръстени да се образуват в точката на контакт;
- кръв, разредена в епруветка, разбъркайте добре. Краят на кръгла стъклена пръчка отнема капка кръв и я довежда до ръба на полираното стъкло на камерата;
- след напълване на камерата, тя се оставя за 1 минута в покой за утаяване на левкоцити;
- Левкоцитите се разглеждат при ниско увеличение (обектив × 8 или × 9, окуляр × 10 или × 15) с потъмнено зрително поле (с понижен кондензатор или стеснена диафрагма);
- за задоволителни резултати левкоцитите се преброяват в 100 големи квадрата.
Знаейки обема на голям квадрат и степента на разреждане на кръвта, намерете броя на левкоцитите в 1 μl и 1 l кръв. Страната на големия квадрат е 1/5 mm, площта е 1/25 mm2, обемът на пространството над този квадрат е 1/250 mm3.
Формула за отчитане на белите кръвни клетки:
където Б е броят на левкоцитите в 100 големи квадрата;
P - степента на разреждане (20).
Брой левкоцити
Норма: 4.0–9.0 × 10 9 / L
Нарича се увеличение на броя на левкоцитите над 9,0 × 10 9 / l
левкоцитоза, намаляване на техния брой под 4.0 × 10 9 / l - левкопения. Въпреки това, дори 3,5 х 109 в 1 л левкоцити за определен брой индивиди могат да бъдат норма. Според литературата такива хора имат повишена имунна резистентност и е по-малко вероятно да се разболеят, което изглежда се дължи на необходимостта от имунен отговор да има резерв от левкоцити в тъканите, където има 50–60 пъти повече, отколкото в кръвния поток. Очевидно при здрави индивиди с нисък брой на белите кръвни клетки в периферната кръв, техните запаси в тъканите съответно се увеличават. Това явление се обяснява с наследствен и фамилен характер или чрез увеличаване на влиянието на парасимпатичната нервна система.
Левкопенията може да бъде функционална и органична.
Функционалната левкопения се свързва с нарушена регулация на кръвообращението и се наблюдава:
- с някои бактериални и вирусни инфекции (коремен тиф, грип, едра шарка, рубеола, болест на Botkin, морбили);
- под действието на лекарства (сулфонамиди, аналгетици, антиконвулсанти, антитиреоидни, цитостатични и други лекарства);
- при мускулна работа, въвеждане на чужди протеини, нервни и температурни ефекти, гладуване, хипотонични състояния;
- фалшива левкоцитопения може да бъде свързана с агрегиране на левкоцити по време на продължително съхранение на кръв при стайна температура (повече от 4 часа).
Органичната левкопения в резултат на аплазия на костния мозък и нейното заместване с мастна тъкан се среща, когато:
- апластична анемия;
- агранулоцитоза;
- левкопенна левкемия;
- някои форми на болестта на Ходжкин;
- йонизиращо лъчение;
- хиперспленизъм (първичен и вторичен);
- болести на колагена.
левкоцитоза
Левкоцитозата е реакцията на хемопоетичната система върху ефектите
екзогенни и ендогенни фактори. Има физиологична и патологична левкоцитоза.
Физиологичната левкоцитоза е:
- храносмилателна - след хранене, особено с високо съдържание на протеин; броят на левкоцитите не надвишава 10,0 - 12,0 × 10 9 / l и след 3-4 часа се връща към нормалното;
- с емоционален стрес (адреналин), тежко физическо натоварване, охлаждане, прекомерно излагане на слънце (слънчево изгаряне), прилагане на редица хормони (катехоламини, глюкокортикостероиди и др.), през втората половина на бременността, по време на менструация и поради неравномерното разпределение на левкоцитите в кръвта мейнстрийм.
Патологичната левкоцитоза се разделя на абсолютна и относителна.
Абсолютна левкоцитоза - увеличаване на броя на левкоцитите в кръвта до няколко стотин хиляди (100.0–600.0 × 10 9 / l и повече).
- Най-често се наблюдава при левкемия: при хронична левкемия - в 98-100% от случаите, при остра левкемия - при 50-60%. Промяната на съотношението на левкоцитните клетки в костния мозък и кръвната пунктация служи като основа за диагностициране на левкемия.
Наблюдава се относителна левкоцитоза:
- остри възпалителни и инфекциозни процеси, с изключение на коремен тиф, грип, едра шарка, рубеола, болест на Боткин, морбили. Най-голяма левкоцитоза (до 70.0–80.0 × 10 9 / l) се наблюдава при сепсис;
- под въздействието на токсични вещества (отрови от насекоми, ендотоксини), йонизиращи лъчения (веднага след облъчване);
- в резултат на действието на кортикостероиди, адреналин, хистамин, ацетилхолин и дигиталисни препарати;
- с тъканна дезинтеграция (некроза), миокарден инфаркт, тромбоза на периферните артерии с развитие на гангрена, изгаряния, ексудативен плеврит, перикардит, уремия, чернодробна кома;
- значителна загуба на кръв при наранявания, вътрешни, гинекологични и други кръвоизливи.
Увеличаването на броя на левкоцитите при инфекциозни заболявания в повечето случаи е придружено от изместване на левкоцитната формула в ляво
Брой на левкоцитите и броя на левкоцитите.
За да се преброят левкоцитите, кръвта се разрежда в смесители или в епруветки. За целта използвайте 3-5% разтвор на оцетна киселина (за унищожаване на червените кръвни клетки), оцветени с анилинова боя (за оцветяване на ядра от левкоцити). Мрежата за броене се запълва по същия начин, както при броенето на червените кръвни клетки. Левкоцитите се преброяват в 100 големи квадрата. В мрежата на Горяев е удобно да ги преброим в непрекъснати квадрати (има 100 от тях в мрежата). Като се има предвид разреждането на кръвта и обема на течността над квадратите, се изчислява постоянен множител. При размножаване 20 пъти е 50.
При работа с епруветки те предварително се изсипват в тях 0,38 ml течност и в нея се отделят 0,02 ml кръв. За да се изчисли автоматичното преброяване в епруветките, червените кръвни клетки се хемолизират със сапонин. Нормалният брой на белите кръвни клетки е 4.3 • 10 9 -11.3 • 10 9 / l, или 4300-11 300 в 1 μl кръв.
Броят на левкоцитите се преброява в оцветени мази.
Доброто намазка отговаря на следните изисквания: тя е тънка, а оформените елементи лежат в нея в един слой; в този случай намазката е жълта и прозрачна. Доброто намазване е равномерно и клетките не са повредени от размазване. За да може кръвта да лежи равномерно върху стъклото, тя се обезмаслява чрез изгаряне на газова горелка над пламъка или се съхранява в смес от алкохол и етер. С края на чашата те докосват прясно освободената малка капка кръв и я разпръскват незабавно върху стъклото. Преди оцветяване намазка се фиксира чрез потапяне в метанол в продължение на 3 минути, в етанол или в смес с етер в продължение на 30 минути. Има редица други фиксатори. Тампонът, изсушен след фиксацията, се пълни с багрило.
За да се разграничат кръвните клетки (определения на левкоцитната формула) се прибягва до диференциално оцветяване. Най-широко използваното оцветяване от Романовски-Гимзе. Това багрило е смес от слабо кисели (еозин) и слабо алкални (лазурно II) бои. Клетките и техните части, в зависимост от реакцията на средата, възприемат един или друг компонент от багрилото в тях: кисели (базофилни) вещества са оцветени в лазурно синьо, алкален (оксифилен) оцветен еозин червен; Неутралното възприема и двата цвята и става пурпурно.
Левкоцитната формула се отнася до процента на отделните форми на кръвните левкоцити.
За достатъчно точни изчисления е необходимо да се видят най-малко 200 бели кръвни клетки.
Преброяването се извършва с потапяща система. Поради факта, че клетките са неравномерно разположени в мазилката (по-големите отиват до ръбовете), е важно да се придържат към такъв ред на движение върху намазката, в която нейните ръбове и средната зона ще се разглеждат еднакво. Използва се един от двата начина на движение: единият от тях премества хода от горния край до долния, премества го от 2 до 3 зрителни полета по ръба, след това отива в обратна посока към горния край и т.н. —6 полета до средата на инсулт, след това същата сума настрани, след това обратно към ръба, преместете настрани няколко полета странично и повторете отново движението, докато се преброят 50 клетки. Вижте 4 от тези места в 4-те ъгъла на размазването. Преброяват се 200 клетки, броят им се разделя наполовина и се определя броя на всеки вид бели кръвни клетки.
Левкоцитите са елементи на кръвта, които бързо реагират на различни външни влияния и промени в тялото. Определянето на общия брой левкоцити може да бъде от голяма диагностична стойност, тъй като разкрива състоянието на кръвотворните органи или техния отговор на вредните ефекти. Увеличаването на броя на левкоцитите - левкоцитоза - е резултат от активирането на левкопоезата, намаляването на техния брой - левкопения - може да зависи от инхибирането на кръвотворните органи, тяхното изчерпване и увеличеното разпадане на левкоцитите под действието на анти-левкоцитни антитела 1. Неутрофили. Най-променливата група левкоцити са неутрофили, чийто брой нараства при много инфекции, интоксикации и разпадане на тъканите.
Характерно за активния неутронизъм е не само увеличаване на общия брой на неутрофилите в кръвта, но и появата на незрели форми в него: увеличава се броят на прободоносните клетки, появяват се млади неутрофили, понякога дори миелоцити. Това "подмладяване" на неутрофилния състав се нарича преместване на левкоцитите наляво. Защитната роля на неутрофилите се определя от тяхната фагоцитна функция, бактерицидно действие и освобождаване на протеолитични ензими, които насърчават резорбцията на некротична тъкан и заздравяването на рани.
Най-често се извършва регенеративна смяна в присъствието на възпалителен процес или некроза. Много остър ляв смяна към промиелоцити и дори миелобласти със значителна левкоцитоза се нарича левкемидна реакция. Намаляването на броя на неутрофилите - абсолютна неутропения - настъпва, когато костният мозък подтиска експозицията на токсини на някои микроорганизми (причинители на коремен тиф, бруцелоза и др.) И вируси, йонизиращи лъчения, редица лекарства.
2. Лимфоцити. Лимфоцитоза се наблюдава в периода на възстановяване от остри инфекциозни заболявания, с инфекциозна мононуклеоза, инфекциозен лимфоцитоза, лимфоцитна левкемия, рубеола, бруцелоза, тиреотоксикоза.
Абсолютна лимфопения се появява при лъчева болест, системни лезии на лимфната система: лимфом, лимфосаркома.
3. Еозинофили. Те се срещат в кръвта в сравнително малки количества (намиращи се главно в тъканите), но броят им се увеличава, понякога значително, при алергични процеси (серумна болест, бронхиална астма), хелминтни инвазии и сърбежни дерматози.
Намаляване на броя на еозинофилите - еозинопения - до пълното им изчезване се наблюдава при сепсис, тежки форми на туберкулоза, коремен тиф и тежка интоксикация.
4. Базофили. Преносители на важни медиатори на тъканния метаболизъм ("еквивалентни" кръвни клетки от мастна тъкан). Когато един организъм е чувствителен, техният брой се увеличава и когато алергенът е въведен отново, той рязко намалява в резултат на разпадането им.
5. Моноцити. Увеличаването на броя на моноцитите - моноцитоза - е индикатор за развитието на имунните процеси. Моноцитите се разпознават като аналози на тъканни макрофаги. Моноцитите се срещат при редица хронични заболявания (хрониосепсис, туберкулоза, сифилис). Понякога се наблюдава моноцитопения при тежки септични, хипертоксични форми на коремен тиф.
Agranulocytes. Отличителна черта на агранулоцитите са несегментираното ядро и базофилната (синя) цитоплазма.
Лимфоцитите са най-малкият размер на левкоцитите. Сърцевината е кръгла, овална или с форма на боб; заема по-голямата част от клетката, интензивно оцветена. Цитоплазмата на повечето лимфоцити с тесен ръб обгражда ядрото, оцветена е в светло син цвят и се избистря до ядрото.
Моноцитът е най-големият от кръвните клетки. Голямо ядро с неправилна форма и относително светъл цвят. Цитоплазмата е сиво-синя, опушен цвят, не се избистря до сърцевината
В допълнение към тези клетки, това е рядкост в нормалната кръв, а плазмените клетки често могат да се появят при заболявания. Те се отличават с ексцентрично разположена плътна сърцевина, често с подобна на колело структура. Броят на тези клетки се увеличава при някои инфекциозни заболявания, сепсис на рани и множествен миелом.
При изчисляване на левкоцитната формула, вниманието се обръща не само на количествените промени в него, но и на качествените промени във формата на елементите. По-рано бяха отбелязани дегенеративни промени в левкоцитите. При тежка интоксикация, неутрофилната гранулация става обилна, голяма, интензивно оцветена и се нарича токсична (или токсична). Понякога се откриват кървави петна в кръвните мази, боядисани като ядрено вещество от левкоцити. Това са така наречените сенки на Botkin - Humprecht - остатъци от ядрен хроматин, които показват повишена крехкост на левкоцитите, което води до тяхното разпадане - левкоцитолиза
99. Методи за определяне на кръвната група, концепцията за Rh фактор.
1. Определяне на кръвна група по стандартни серуми: t
Необходимо е следното оборудване:
o два комплекта стандартни хемаглутиниращи серуми I (0), II (A), III (B) групи от две различни серии и един флакон от серум IV (AB)
• бутилка с изотоничен разтвор на натриев хлорид с пипета
o почистете измитата суха плоча
o стъклени пързалки
стерилни игли за копие за пробиване на плътта на пръста
o стерилни марлеви топчета,
Стандартните серуми за определяне на кръвна група съгласно системата ABO се произвеждат със специфична цветна маркировка.: I (0) - безцветен, II (A) - синьо, III (B) - червено, IV (AB) - жълто. Серумът се съхранява при 4-10 ° С. Серумът трябва да е лек и прозрачен. Наличието на люспи, утайка, мътност са признаци на серумна непригодност. Първите признаци на аглутинация трябва да се появят не по-късно от 30 секунди.
Табелата се разделя на 4 квадрата с оцветен молив и по посока на часовниковата стрелка се обозначават квадратчетата I (0), II (A), III (B). Голяма капка серум от две групи I (0), II (A), W (B) групи се поставя в съответния квадрат на плаката с пипета. Подложката за пръстите се третира с алкохол и иглата се пробожда върху кожата. Първата капка кръв се отстранява с топче от марля, последващите капки в различни части на предметното стъкло се нанасят последователно на капки серум и се разбъркват добре. Капка кръв трябва да бъде 5-10 пъти по-малка от капка серум. След това чрез разклащане на плаката внимателно се смесва кръвта със серум. Предварителните резултати се оценяват след 3 минути, след което се добавя капка изотоничен разтвор на натриев хлорид, разбърква се отново чрез разклащане на плаката и след 5 минути се извършва окончателна оценка на реакцията на аглутинация.
При положителен тест за изохемаглутинация, люспите и ядките от прилепналите червени кръвни клетки не се разминават при добавяне на изотоничен разтвор на натриев хлорид и разбъркване.
При отрицателна реакция капки серум върху плака прозрачни, равномерно розови, не съдържат люспи и зърна.
Възможни са следните 4 комбинации от реакции на аглутинация със стандартни серуми от групите I (0), II (А), III (В).
v Всичките 3 серуми от двете серии не се аглутинират. Кръвен тест -
I група.
v Реакцията на изохимаглутинацията е отрицателна със серумни Р (А) групи от двете серии и положителни със серумни I (0) и III (В) групи. Кръвен тест -
II (А) група.
v Реакцията на изохемаглутинацията е отрицателна със серум от III (B) група и в двете серии и положителни със серум от I (0) и II (A) групи. Кръвен тест -
III (В) група.
v Серумни I (0), II (А), III (В) групи дават положителна реакция и в двете серии. Кръвта принадлежи към IV (AB) групата. Но преди да се направи такова заключение, е необходимо да се проведе реакция на изохемаглутинация със стандартен серум IV (АВ) на групата, като се използва същата процедура. Отрицателният тест за изохемаглутинация позволява най-накрая да се определи кръвта за изследване на IV (АВ) групата.
2. Концепцията за Rh фактор.
В еритроцитите се открива друг антиген (аглутининоген), който се нарича Rh фактор. Всички хора са разделени на индивиди с Rh-положителна (Rh +) и Rh-отрицателна (Rh) кръв. Установено е, че 85% от хората в еритроцитите съдържат Rh фактор, т.е. кръвта им е Rh-положителна, а 15% не я съдържат, т.е. кръвта на тези хора е Rh-отрицателна. Към Rh фактора (Rh-антиген), обикновено няма анти-Rh-аглутинин (готови антитела) в кръвта. Такива антитела се появяват в кръвния серум само в резултат на имунизация на човек с Rh-отрицателна кръв с Rh-позитивни еритроцити. Такава имунизация настъпва поради многократно преливане на Rh-положителна кръв към Rh-отрицателен реципиент или по време на бременност на жена с Rh-отрицателна Rh-положителна кръв. Имунизирани по този начин, хората стават чувствителни: когато се прелива с Rh-положителна кръв, се развива сериозно усложнение - шок за кръвопреливане.
Преброяване на броя на левкоцитите и тромбоцитите
Фактори, влияещи върху коректността на изследването на белите кръвни клетки
- дълго съхранение на кръв при стайна температура
Норми на съдържанието на левкоцити в кръвта
Възраст Брой левкоцити
- 1 ден 11.6 - 22.0
- 1 седмица 8.1.- 14.3
- 1 месец 7.6 - 12.4
- Възрастни 4.0 - 9.0
Методи за определяне на броя на левкоцитите в кръвта.
- Преброяване на броя на левкоцитите в камерата за броене
- Броене на левкоцити в хематологични анализатори
Определяне на броя на левкоцитите в броената камера.
- Преброяването на левкоцити под микроскоп се извършва след лизиране на червените кръвни клетки в 100 големи квадрата на броената мрежа и преизчисляване за 1 литър кръв, въз основа на обема на квадратите и разреждането на кръвта. Броят на левкоцитите трябва да се направи в рамките на 2-4 часа след вземането на кръвта.
- Ако в периферната кръв има ядрени еритроцити, те не се лизират и преброяват заедно с левкоцити. В този случай, за да се определи истинският брой левкоцити, броят на клетките в червения ред се изважда от общия брой на броените клетки.
- Например: Общият брой на левкоцитите в изчислението в камерата (или анализатора) -45x109 / l. При изчисляване на левкоцитната формула е установено, че присъстват 50 еритробласти (нормобласти) на 100 левкоцити.
Изчисляваме действителния брой левкоцити в кръвта:
150 клетки - 45 х 109 / l
100 клетки (левкоцити) - X
X = 100 * 45 * 10/1/150 = 30 * 10/1
Така истинският брой левкоцити в кръвта е 30 х 109 / l.
Основните източници на грешки при изчисляването на левкоцитите в камерата:
- Неправилно съотношение на обемите кръв и оцетна киселина, взети в епруветка.
- Неправилно приготвен разтвор на оцетна киселина (при концентрация повече от 5%, някои левкоцити могат да се лизират, което ще доведе до подценяване на резултата).
- Продължителното излагане на пробата при температури над 28 ° С, което може да ускори лизиса на левкоцитите в пробата и да доведе до подценяване на резултата.
- Неправилно пълнене на камерата Горяев. Както при изчисляването на червените кръвни клетки, камерата трябва да се остави за 1 минута, за да се утаят клетките.
- Камерата на Горяев не беше измита достатъчно добре след предишното определение. Оставащите в камерата левкоцити могат да надценяват резултатите от анализа.
Методи за броене на тромбоцитите
- в камерата за броене
Всяка група методи има предимства и недостатъци.
- Преброяването на тромбоцитите в камерата е достатъчно точно, не изисква изчисляване на броя на червените кръвни клетки. От друга страна, този метод е по-труден, тъй като тромбоцитите в естествената форма са представени от малки и слабо контрастирани елементи. Недостатък на метода е броенето на тромбоцитите в следващите часове след вземане на кръв.
- Определянето на броя на тромбоцитите в кръвните намазки е значително по-ниско по отношение на точността на камерата или автоматичните броячи. Грешки в преброяването на кръвните намазки могат да се дължат на лошо качество на намазката и свързаното с това неравномерно разпределение на тромбоцитите, неточно определяне на броя на червените кръвни клетки. Съществен недостатък на метода е необходимостта от едновременно отчитане на тромбоцитите и червените кръвни клетки в кръвта. Предимството на това е способността да се изследват тромбоцитите по всяко време, независимо от времето на вземане на кръв.
- Методът за определяне на тромбоцитите с помощта на хематологичен анализатор ви позволява да определите точно броя на тромбоцитите, техния среден обем и разпределение по обем.
Унифициран метод за отчитане на броя на левкоцитите в кръвта в камерата за броене;
Методи за преброяване на броя на левкоцитите в кръвта
Унифицирани 2 метода за определяне на броя на левкоцитите в кръвта:
- в камерата за броене;
- използване на хематологични анализатори.
Принцип Левкоцитите се преброяват под микроскоп в определен обем от броената камера с постоянно разреждане на кръвта след разрушаването на червените кръвни клетки.
Реагент: 3-5% разтвор на оцетна киселина, оцветени с воден разтвор на метиленово синьо, за да се оцвети ядрата на левкоцитите и да се улесни тяхното преброяване. Разтворът е син цвят, стабилен при съхранение.
Специално оборудване: микроскоп, броене камера Горяева.
Курсът на определяне. С помощта на мерителна пипета или автоматичен дозатор точно 0,4 ml разтвор на оцетна киселина се излива в аглутинационната епруветка и към нея се добавя 0,02 ml (сали капиляр) кръв. Капилярът се измива няколко пъти с киселинен разтвор и се смесва съдържанието на епруветката. Това води до разреждане на кръвта 20 пъти. Оставя се до преброяване, но не повече от 2-4 часа след вземането на кръв. Камерата на Горяев е подготвена за работа чрез избърсване на покривно стъкло, така че да се появят пръстените на дъгата. Още веднъж се разклаща добре съдържанието на епруветката и се напълва камерата на Горяев с тази смес, като се използва пипета на Пастьор или стъклена пръчка с разтопен край. Запълнената броева камера се оставя за 1 минута в хоризонтално положение за утаяване на левкоцитите. Левкоцитите се преброяват в 100 големи квадрати без графика на камерата за броене при условията: кондензаторът се спуска, окуляра 10х или 15х, леща 8х. Броенето започва от горния ляв ъгъл на мрежата на камерата Горяев. Когато преброяват левкоцити, те следват правилото: всички клетки вътре в квадрата и по линиите на разграничението се преброяват, ако те най-често влизат в квадрата. Клетките, пресечени от разделителна линия точно на половина, се броят само от двете страни на квадрат (например, лявата и горната).
Изчисление. Когато се изчислява броят на левкоцитите в 1 μl кръв, използвайте формулата:
- броя на левкоцитите в 1 mkl кръв;
а - броя на левкоцитите, изчислени в 100 големи квадрата;
4000 - коефициент на обем на обем до 1 µl, въз основа на обема на малкия квадрат, който е µl;
1600 - броят на преброените малки квадрати;
20 - разреждане на кръвта.
За преобразуване на броя на левкоцитите в единици SI (в 1 l кръв), получената цифра се умножава по 10 6.
Практически за определяне на съдържанието на левкоцити в 1 l кръв, броят на левкоцитите, изчислен в 100 големи квадрата на броената камера, се умножава по 50, разделен на 1000 (т.е. прехвърлен към запетая с 3 знака вляво) и умножен по 10 9.
Методи за отчитане на левкоцити в камерата на Горяев, норми на показателите и отклонения
Камерата Горяев е устройство за измерване на броя на клетките и частиците в определен обем течност (кръв, урина), състоящи се от специален дебел предмет и покривно стъкло.
Стъкло слайд има вдлъбнатина област в средата, на която се прилага мрежа от 225 големи квадрати. От тези квадрати, 25 са равномерно разделени на 16 по-малки квадрата. Поради този обем на мрежата, изчислението се извършва по-точно, отколкото при други преносими устройства за броене.
Обслужване на камерата
След използване на инструмента, слайда се дезинфекцира чрез потапяне в 4% разтвор на формалин за един час или в 70% разтвор на етанол в продължение на половин час. След това камерата се промива старателно с дестилирана вода. Излишната течност се отстранява с мека кърпа. Струва си да се обърне внимание на факта, че камерата не може да се изтрие с памучен тампон, защото влакната се придържат към него. Съхранено стъкло на сухо място.
По време на използването на фотоапарата се изчисляват ПЕ, които са разположени вътре в квадратчето на решетката и в горната и лява линия на периметъра му. В този случай частиците, които се допират до дясната и долната линия на периметъра по време на изчисляването на тази клетка, не са включени.
Определяне на левкоцити в кръвта
Метод за преброяване на левкоцити
Изчисляването на броя на левкоцитите започва с разреждането на кръвта в 3-5% разтвор на етанолова киселина с метил синьо 20 пъти. Работният материал преди употреба се подсушава с марля.
Покривното стъкло трябва да се избърше преди появата на цветни пръстени на Нютон. След това камерата се пълни с разредена кръв, докато първите две капки се освобождават върху филтърна хартия. Течността влиза в камерата поради капилярното свойство на водата. Важно е да се гарантира, че при зареждането нищо не се влива в каналите. Ако това се случи, течността внимателно се отстранява с филтърна хартия. След това оставете мрежата само за минута, изчаквайки FE да спре движението си.
Броят на белите кръвни клетки се извършва в рамките на сто големи квадрата при ниско увеличение, т.е. с окуляр 10х и обектив 8х, според правилото на Егоров. Получената цифра се използва във формулата.
X = (n × 250 × 20) / 100 или X = n × 50
X - броят на левкоцитите.
n е броят, получен чрез преброяване в камерата.
Определя се броят на левкоцитите, като се отчита броят на големите квадрати на решетката - 100 и разреждането на кръвта - 20.
Как се брои левкоцитите
Степен на левкоцити и аномалии
Скоростта на левкоцитите при хора е 4,0 - 9,0 × 10 / l. Или, по различен начин, около 6 000 бели кръвни клетки се намират в 1 кубичен мм кръв.
Външни физиологични фактори могат да повлияят на отклонения от нормата:
- прием на храна преди кръводаряване;
- стрес;
- бременност или менструация при жени;
- хипотермия или прегряване;
- голямо физическо натоварване преди тестване.
Ако броят на белите кръвни клетки надвишава 9,0 × 10 / l (левкоцитите са повишени), това състояние се нарича левкоцитоза. Подобна картина може да се види и при злокачествени заболявания на кръвта, инфекции, радиационни увреждания и отравяния.
Лекарствата също могат да увеличат броя на левкоцитите. Некроза на тъканите, тежко кървене, включително в резултат на операции, бъбречна кома, сърдечно заболяване - всичко това може да доведе до левкоцитоза.
Спадът в броя на левкоцитите под 3.9 × 10⁹ / l се нарича левкопения. Въпреки това, при някои хора фиксиран брой левкоцити е фиксиран на 3,5 × 10 / l. Смята се, че такива хора поддържат резерв от тези клетки в тъканите 50 пъти повече, отколкото в кръвта. Има и функционална левкопения след прилагане на аналгетици, сулфонамиди и други лекарства, след продължителна мускулна работа, в резултат на инфекция и вируси (тиф, грип и морбили).
Левкоцитна формула
Всички видове левкоцити представляват левкоцитна формула. На него можете да идентифицирате определени патологии. Нормите на формулата варират в зависимост от възрастта и периода на живота на човека. Промяната е ясно видима при жените по време на бременност или след раждане.
Използват се различни методи за изчисляване на съотношението на типовете на тези клетки, но всички те са свързани с факта, че по-тежките клетки (например базофили) са разположени по-близо до ръба на намазката, а лимфоцитите, като светли клетки, остават в средата.
- Метод Филипченко. При този метод изчислението се извършва по напречната права линия на границата от единия до другия край. Ударът е психически разделен на три части.
- Метод на Шилинг. Левкоцитите се преброяват в четири области на намазка.
Получените данни се записват в таблицата. Индивидуално броят на всеки тип бели кръвни клетки се изчислява по формулите. Отбелязаха тези елементи, които се появиха. Резултатът се запазва до момента, докато сумата от всички преброени клетки е 100.
Методи за преброяване на левкоцитите в урината
В урината се изчислява броят на левкоцитите в клетката Goryaeva Nechiporenko. Този анализ е необходим за наблюдение на бъбречно заболяване. Периодичното изследване на урината помага да се следи коректността на лечението и ефективността на предписаната терапия.
Събиране на урина
В проучването е само първата утринна урина в средата на уринирането. Важно е пациентът да следва основните правила за събиране на този биоматериал. Не се изисква специално допълнително обучение за обучението.
Метод на изчисление
10 ml прясно събрана урина се центрофугира в продължение на три минути при 2,5 хил. Оборота в минута. Преди това е необходимо да се гарантира, че урината, за да се избегне частично разпадане на клетките, има слабо кисела реакция.
С помощта на пипета с тесен, изтеглен край, отстранете горния слой. In vitro се оставят от 0,5 ml урина до 1 ml, в зависимост от обема на утайката.
Утайката се смесва внимателно с супернатантата. Полученият разтвор се използва за запълване на камерата за броене на Goryaev по подобен принцип, който се използва при изчисляване на PV на кръвта. Камерата се оставя сама за 3 до 5 минути.
Белите кръвни клетки трябва да бъдат преброени на големи квадратчета по цялата решетка с 7x окуляр и 40x обектив.
Получената цифра се използва във формулата:
X = (a / 0.9) × (1000 / V)
X - броят на левкоцитите в 1 ml урина.
a - изчисленото количество, разделено на обема на камерата в 1 μl утайка от урина.
v - Количеството урина, взето за изследването.
1000 - количеството на седимента.
Това е важно! Норма на левкоцитите: в 1 ml урина не повече от 2 × 10³ бели кръвни клетки.
Броят на левкоцитите в кръвта
Персоналът на лабораторията за откриване на кръвна картина на левкоцитите най-често използва камерата на Горяев. Преброяването на левкоцитите в камерата на Горяев е по-малко точен метод, отколкото определянето на левкоцити с използване на електронни устройства. Величината на грешката е ± 7%.
Как се прави броенето
- В епруветката се налива 0,4 милилитра от разреждащата течност, както и 0,02 милилитра капилярна кръв. Готовото размножаване се счита за равно на 1:20.
- Като разреждаща течност обикновено се използва 3 или 5% разтвор на оцетна киселина. Предварително се оцветява с метиленово синьо, което по реакция оцветява ядрата на левкоцитите.
- Преди напълване на камерата тръбата на Горяев се разклаща възможно най-пълно. Напълването на камерата е същото като при броенето на червените кръвни клетки.
Функции за изчисление
С броя на левкоцитите, значително по-ниски от червените кръвни клетки, изчислението се прави в 100 големи квадрата. В 100 квадрата се изчислява броя на левкоцитите.
При обем от малък квадрат от 14 000 кубични милиметра и 20-кратно разреждане на кръвта, броят на левкоцитите се изчислява по следния начин: 4000x20, след което се разделя на 1600. Оказва се, 1/2 x a.
За да получите броя на белите кръвни клетки в 1 µl, изчислената цифра трябва да се раздели на 2 и да се добавят още две нули.
Отклонението на левкоцитите от нивото показва левкоцитоза и левкопения и изисква незабавно подробно изследване, тъй като има голяма вероятност за наличие на туберкулоза, пневмония, сепсис, коремен тиф, лъчева болест.